ถ้าตรวจพบเชื้อเอชไอวี “Window period” หรือเมื่อใดที่การตรวจ ELISA เพื่อหาเชื้อ HIV เชื่อถือได้อย่างสมบูรณ์? การทดสอบอิมมูโนล็อตติงคืออะไร?

การตรวจเลือดเอชไอวีหรือการตรวจเอชไอวีมีหลายวิธี การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการเพื่อตรวจสอบการมีอยู่ของไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่อง (HIV) เพื่อตรวจหาแอนติบอดีต่อโปรตีน (อิมมูโนโกลบูลิน) หรือแอนติเจน (โปรตีนของไวรัส) ในเลือด น้ำลาย หรือปัสสาวะของผู้ป่วย ไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องในมนุษย์มีความแปรปรวนของแอนติเจนที่เป็นเอกลักษณ์ ซึ่งสัมพันธ์กับอัตราการถอดรหัส (การสืบพันธุ์) สูง ซึ่งทำให้ทั้งการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีและการป้องกันทำได้ยาก

พื้นฐานในการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีเช่นเดียวกับคนอื่นๆ โรคติดเชื้อโกหก:

• ประวัติศาสตร์ทางระบาดวิทยา
• ข้อร้องเรียนลักษณะเฉพาะของผู้ป่วย
• ภาพทางคลินิกของโรค
• ข้อมูล วิธีการทางห้องปฏิบัติการวิจัย.

เมื่อมีการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีแล้ว เพื่อชี้แจงลักษณะของโรคที่เป็นต้นเหตุและโรคทุติยภูมิ การตรวจผู้ป่วยเพิ่มเติมจะดำเนินการและกำหนดการรักษาที่เหมาะสม

ความรุนแรงของโรคประเมินโดยระดับความเข้มข้นของไวรัสในเลือด จำนวนเซลล์เม็ดเลือดขาว CD4 และการกำหนดแอนติเจน p24

การวินิจฉัยเอชไอวีประเภทหลัก

การวินิจฉัยทางไวรัสวิทยาขึ้นอยู่กับการตรวจหาเชื้อเอชไอวีในเนื้อเยื่อและของเหลวทางชีวภาพของผู้ป่วย

ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส(PCR) ใช้ในการตรวจหาไวรัสและประเมินปริมาณไวรัส ซึ่งทำให้สามารถตัดสินประสิทธิผลของการรักษาเฉพาะและทำนายระยะของโรคติดเชื้อได้

การวินิจฉัยทางเซรุ่มวิทยาการติดเชื้อเอชไอวีเกี่ยวข้องกับการตรวจหาแอนติเจนของไวรัสและแอนติบอดีในเลือด การตรวจหาแอนติบอดีต่อการใช้ ELISA (การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์) เป็นวิธีหลักในการวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการ ผลลัพธ์เชิงบวกทั้งหมดได้รับการยืนยันโดยอิมมูโนล็อตติง ขึ้นอยู่กับการตรวจหาแอนติบอดีในเลือดและของเหลวทางชีวภาพของผู้เข้ารับการทดสอบ ใช้ในกรณีที่จำเป็นต้องได้รับผลอย่างรวดเร็ว

ระดับของการกดภูมิคุ้มกันกำหนดโดยวิธีการนับ CD4 และ CD8 ลิมโฟไซต์ ตามด้วยการกำหนดหาอัตราส่วน CD4:CD8

วิธีการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีในห้องปฏิบัติการแต่ละวิธีมีลักษณะเฉพาะคือความไว (% ของการทดสอบที่ระบุอย่างถูกต้องในกลุ่มตัวอย่างที่ชัดเจน (+)) และความจำเพาะ (% ของการทดสอบที่ระบุอย่างถูกต้องในกลุ่มตัวอย่างเชิงลบที่เห็นได้ชัด) ผลการตรวจเอชไอวีจะถูกตีความว่าเป็นลบ บวก หรือไม่ชัดเจน

ข้าว. 1. ในภาพด้านซ้าย เอชไอวีแพร่เชื้อไปยังเซลล์ภูมิคุ้มกัน (แสดงด้วยสีเหลือง) ในภาพด้านขวาคือลิมโฟไซต์ที่ติดเชื้อ HIV โครงสร้างที่ยาวบนผิวเซลล์มีสาเหตุมาจากการผลิตโปรตีนมากเกินไป

ข้าว. 2. ภาพถ่ายแสดงกระบวนการปล่อย (การแตกหน่อ) ของ virions ออกจากเซลล์ที่ติดเชื้อ

การตรวจเลือดเพื่อหาเชื้อเอชไอวี สิ่งที่คุณต้องรู้

ผู้ที่อาศัยอยู่ในประเทศของเราสามารถตรวจเลือดหาเชื้อ HIV โดยไม่เปิดเผยตัวตนและไม่มีค่าใช้จ่าย แต่มีบุคคลบางประเภทที่ต้องเข้ารับการตรวจหาเชื้อเอชไอวี ซึ่งรวมถึง:

• ผู้บริจาคเลือดและส่วนประกอบทั้งหมด ตลอดจนเนื้อเยื่อและของเหลวทางชีวภาพอื่นๆ
• ผู้ที่ได้รับการถ่ายเลือดหรือการปลูกถ่าย (ดำเนินการในช่วง 3 เดือนแรกหลังการผ่าตัด)
• สตรีมีครรภ์;
• ผู้ได้รับบาดเจ็บจากอุบัติเหตุ
• ผู้ที่มีอาการทางคลินิก - มีไข้, ท้องร่วง, ไอถาวรและต่อมน้ำเหลืองโตมากกว่า 2 กลุ่ม, นานกว่า 1 เดือน, น้ำหนักลดโดยไม่ทราบสาเหตุ, โรคติดเชื้อที่เกี่ยวข้องกับเอดส์และฉวยโอกาส, ร่างกายและเนื้องอกวิทยา;
• พลเมืองต่างประเทศ
• บุคคลที่มีความเสี่ยง (ผู้ติดยาและโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์)

ใครก็ตามที่เคยสัมผัสเชื้อเอชไอวีควรได้รับการตรวจหาเชื้อเอชไอวี

ข้าว. 3. การตรวจเลือดหาเชื้อ HIV ในประเทศของเราสามารถทำได้โดยไม่เปิดเผยตัวตนและไม่มีค่าใช้จ่าย

บริจาคเลือดเพื่อเอชไอวีได้ที่ไหน

การตรวจเอชไอวีสามารถทำได้โดยไม่เสียค่าใช้จ่ายในสถานพยาบาลที่ดำเนินการตามงบประมาณ หากคุณมีหนังสือเดินทางและประกันสุขภาพ แพทย์จำเป็นต้องรักษาความลับทางการแพทย์ คุณสามารถเข้ารับการตรวจได้ฟรีโดยไม่เปิดเผยชื่อที่ศูนย์ป้องกันและควบคุมโรคเอดส์ และรับคำแนะนำทางการแพทย์ก่อนและหลังการตรวจ การทดสอบเอชไอวีดำเนินการตามเกณฑ์การชำระเงินในสถาบันการแพทย์เชิงพาณิชย์ บุคคลใดก็ตามที่อาศัยอยู่ในดินแดนนี้ชั่วคราวสามารถเข้ารับการตรวจเอชไอวีได้

ห้องปฏิบัติการจะทำการตรวจเลือดเพื่อหาเชื้อเอชไอวีโดยใช้วิธีเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ (ELISA)

การทดสอบเอชไอวีโดยไม่ระบุชื่อ

ในสถาบันสาธารณสุข (คลินิกและโรงพยาบาล) คุณไม่สามารถตรวจเลือดหาเชื้อ HIV โดยไม่เปิดเผยตัวตนได้ ข้อมูลเกี่ยวกับผลการศึกษาจะเป็นที่รู้จักของแพทย์ในวงแคบที่มีหน้าที่ในการรักษาความลับทางการแพทย์

มีห้องตรวจแบบไม่ระบุชื่ออยู่ที่ศูนย์เอดส์ ซึ่งแต่ละชุดตรวจจะมีการกำหนดหมายเลขไว้

ข้าว. 4. ส่งหลอดทดลองที่มีเลือดไปตรวจทางเซรุ่มวิทยา

บังคับให้ตรวจเอชไอวี

มีกลุ่มประชากรสี่กลุ่มที่บังคับตรวจเอชไอวี แต่ไม่ได้บังคับ:

1. ผู้บริจาคเลือดและวัสดุชีวภาพอื่น ๆ
2. เมื่อสมัครงานในสถาบันที่ลูกจ้างอาจสัมผัสกับวัตถุติดเชื้อและผู้ป่วยอย่างเห็นได้ชัด
3. ชาวต่างชาติเมื่อได้รับวีซ่าเพื่อพำนัก (มากกว่า 3 เดือน) ในอาณาเขตของสหพันธรัฐรัสเซีย
4. หากมีข้อบ่งชี้ทางคลินิกสำหรับผู้ต้องขัง

การบังคับตรวจเชื้อเอชไอวีในประชากรนั้นไร้ประโยชน์และขัดต่อการเคารพสิทธิมนุษยชน การบังคับทดสอบประชากรในสหพันธรัฐรัสเซียถือเป็นสิ่งผิดกฎหมาย

ข้าว. 5. การตรวจเอชไอวีของผู้ต้องขังจะดำเนินการตามข้อบ่งชี้ทางคลินิก

การตรวจเอชไอวีมีค่าใช้จ่ายเท่าไร?

ในสถาบันของรัฐ การตรวจเอชไอวีนั้นฟรี โดยในคลินิกเอกชนจะได้รับค่าตอบแทน:

• ราคาของ ELISA อยู่ระหว่าง 400 ถึง 800 รูเบิล คำตอบจะพร้อมหลังจากผ่านไปหนึ่งวัน มีการวินิจฉัยเร่งด่วนเมื่อสามารถรับคำตอบได้ภายใน 2 ชั่วโมง
• ค่าใช้จ่ายในการตรวจเอชไอวีโดยใช้วิธีอิมมูโนล็อตมีตั้งแต่ 3 ถึง 5,000 รูเบิล ผลลัพธ์จะพร้อมภายใน 4 - 7 วัน
• ค่าใช้จ่ายในการตรวจ HIV โดยใช้วิธี PCR คือ 10 - 12,000 รูเบิล ผลลัพธ์จะพร้อมภายใน 10 - 14 วัน

การตรวจหาเชื้อ HIV ใช้เวลานานแค่ไหน?

ในหน่วยงานของรัฐกำหนดเส้นตายในการรับผลการตรวจเอชไอวีคือ:

• เมื่อใช้ ELISA รุ่นที่ 3 ผลลัพธ์จะให้ผลลัพธ์ที่น่าเชื่อถือที่สุด 12 สัปดาห์นับจากช่วงเวลาที่สงสัยว่าติดเชื้อ
• เมื่อใช้ ELISA รุ่นที่ 4 – 6 สัปดาห์
• เมื่อใช้ PCR - 4 สัปดาห์

วิธีการตรวจเอชไอวี

• จำเป็นต้องทำการทดสอบ HIV ไม่ช้ากว่า 3 ถึง 4 สัปดาห์หลังจากสงสัยว่าติดเชื้อ
• การทดสอบจะดำเนินการไม่ช้ากว่า 8 ชั่วโมงหลังรับประทานอาหาร

ของเหลวชนิดเดียวที่คุณสามารถดื่มได้คือน้ำเปล่า

• สำหรับการวิเคราะห์ เลือด 3 - 5 มิลลิลิตรจะถูกนำมาจากหลอดเลือดดำท่อนซึ่งใช้เข็มฉีดยาหรือเข็มธรรมดาพร้อมปั๊ม
• ก่อนขนส่งเข้าห้องปฏิบัติการ สามารถเก็บซีรั่มในเลือดไว้ในตู้เย็นได้นานถึง 7 วัน โดยไม่ต้องแช่เย็นไม่เกิน 30 นาทีหลังการเก็บ
• การขนส่งหลอดที่มีซีรัมในเลือดดำเนินการในภาชนะเก็บความร้อนพิเศษที่อุณหภูมิ +4 - +8 o C

ข้าว. 6. ในการตรวจหาเชื้อเอชไอวีจำเป็นต้องรวบรวมเลือด 3 - 5 มิลลิลิตรที่นำมาจากหลอดเลือดดำก่อนวัยอันควร - ซึ่งใช้เข็มฉีดยาปกติ (ภาพด้านซ้าย) หรือเข็มที่มีปั๊ม (ภาพด้านขวา)

เมื่อเลือดถูกนำออกจากหลอดเลือดดำ เป็นไปไม่ได้ที่จะติดเชื้อไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์

การทดสอบ HIV เชิงบวกเท็จ และผลการทดสอบประเภทอื่น ๆ

ผลการตรวจเอชไอวีสามารถตีความได้ว่าเป็นบวก ลบ หรือไม่ชัดเจน

ผลการทดสอบที่น่าสงสัย สำหรับเอชไอวีได้รับเมื่อมีแอนติบอดีในซีรั่มเลือดที่ทำปฏิกิริยาข้ามกับโปรตีนของไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ ในกรณีนี้ การวิเคราะห์ซ้ำแล้วซ้ำอีก และในระหว่างดำเนินการจะใช้ระบบการทดสอบที่เฉพาะเจาะจงมากขึ้น หากผลลัพธ์ที่น่าสงสัยยังคงอยู่ ควรทำการทดสอบทุกๆ 1 ถึง 3 เดือนเป็นเวลาหกเดือน

ผลตรวจเป็นบวกสำหรับเอชไอวี(seropositive) บ่งชี้ถึงการมีอยู่ของแอนติบอดีต่อไวรัสในเลือดของผู้ที่จะทดสอบ ในกรณีนี้ ให้ทำการทดสอบเอนไซม์ที่เชื่อมโยงกับอิมมูโนซอร์เบนต์แอสเสย์ (ELISA) ซ้ำ และหากได้รับผลบวกเป็นครั้งที่สอง จะได้รับการยืนยันโดยการทดสอบอิมมูโนล็อตติงด้วยตัวอย่างเลือดเดียวกัน

ผลลัพธ์เชิงลบการทดสอบเอชไอวี(ซีโรเนกาทีฟ) บ่งชี้ว่าไม่มีการติดเชื้อ HIV หรือการติดเชื้อเกิดขึ้นไม่นานมานี้และแอนติบอดียังไม่ได้รับการพัฒนาในเลือดของผู้เข้ารับการทดสอบ (ระยะ "หน้าต่าง") ในกรณีนี้ควรตรวจซ้ำหลังจากผ่านไป 3 และ 6 เดือน

เท็จ ผลลัพธ์ที่เป็นบวกการทดสอบเอชไอวีได้รับการจดทะเบียนเมื่อสาเหตุของโรคไม่ใช่ไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ แต่เป็นการตั้งครรภ์ โรคแพ้ภูมิตัวเอง โรคภูมิแพ้ โรคติดเชื้ออื่นๆ การฉีดวัคซีนล่าสุด เนื้องอกวิทยา การปลูกถ่ายอวัยวะ และแม้แต่อาหารธรรมดา (เมล็ดพืช อาหารรสเผ็ด ไขมันและเปรี้ยวที่รับประทานในแต่ละวัน ก่อนและแม้กระทั่งน้ำแร่คาร์บอเนตสูง) เมื่อทำการทดสอบที่บ้านจะได้รับผลบวกลวงจำนวนมาก

ผลการตรวจ HIV ลบลวงบ่งชี้ว่ามีไวรัสอยู่ในเลือดของผู้ป่วยแต่ยังไม่มีการพัฒนาแอนติบอดี เมื่อทำการวิเคราะห์ PCR ผู้ป่วยที่ติดเชื้อ HIV จะได้รับผลลัพธ์เชิงลบที่ผิดพลาดในช่วงเวลาของการรักษาเฉพาะเมื่อความเข้มข้นของไวรัสในเลือดต่ำมากจนทำให้ระบบการทดสอบล้มเหลว ในกรณีส่วนใหญ่ ผลลัพธ์ลบลวงจะเกิดขึ้นเนื่องจากข้อผิดพลาดทางเทคนิคหรือข้อบกพร่องในระบบการทดสอบ ซึ่งพบได้ยากมากเนื่องจากการควบคุมคุณภาพอย่างเข้มงวดในทุกระดับ

ควรเลื่อนการทดสอบ HIV ออกไปอย่างน้อยสองสัปดาห์หลังจากมีโรคติดเชื้อหรือการฉีดวัคซีน

ข้าว. 7. ดำเนินการตรวจเลือดทางซีรั่ม

ระบบทดสอบเพื่อตรวจสอบการมีอยู่ของแอนติบอดีต่อเอชไอวี

การทดสอบแอนติบอดีต่อไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องในมนุษย์จะประเมินการตอบสนองของร่างกายต่อการติดเชื้อ เพื่อจุดประสงค์นี้ การตรวจวิเคราะห์อิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) ใช้เพื่อตรวจหาแอนติบอดีต่อโปรตีนของไวรัสและการวิเคราะห์อิมมูโนล็อตติงเพื่อยืนยัน (Western blot) ซึ่งจะกำหนดปฏิกิริยาของแอนติบอดีต่อโปรตีนของไวรัส

แอนติบอดีต่อเอชไอวี

ไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์มีคุณสมบัติเป็นแอนติเจนและเมื่อเข้าสู่ร่างกายมนุษย์จะทำให้เกิดการสังเคราะห์แอนติบอดี - อิมมูโนโกลบูลินจำเพาะ เมื่อใช้ระบบการทดสอบสมัยใหม่ จะสามารถระบุระดับของอิมมูโนโกลบูลิน (แอนติบอดี) ได้ในเลือดและของเหลวทางชีวภาพอื่นๆ ของผู้ป่วยเอชไอวี อิมมูโนโกลบูลินระดับ IgM ปรากฏก่อนใครๆ (หนึ่งสัปดาห์หลังการติดเชื้อ) สังเกตการเจริญเติบโตภายในหนึ่งเดือนและคงอยู่ต่อไปอีกประมาณ 30 วัน อิมมูโนโกลบูลินระดับ IgG ไหลเวียนในเลือดเป็นเวลาหลายปี การตรวจพบเป็นตัวบ่งชี้ว่ามีการติดเชื้อเอชไอวี

แอนติบอดีต่อเชื้อ HIV จะปรากฏภายใน 2–4 สัปดาห์ หลังจากติดเชื้อแล้วจึงตรวจพบในเลือดตลอดทั้งโรค

ช่วงเวลา "หน้าต่าง" สำหรับเอชไอวี

แอนติบอดีจะไม่ถูกผลิตขึ้นในร่างกายของผู้ติดเชื้อในทันที ในตอนแรก การติดเชื้อเอชไอวีจะไม่แสดงออกมาในทางใดทางหนึ่ง แอนติบอดีจะปรากฏในเลือดโดยเฉลี่ย 2 - 3 เดือนนับจากช่วงเวลาที่ติดเชื้อ (ตั้งแต่ 2 สัปดาห์ถึง 6 เดือน) ช่วงเวลานี้เรียกว่า "หน้าต่าง" เมื่อการทดสอบแอนติบอดียังคงเป็นลบ แต่ไวรัสจะทวีคูณอย่างเข้มข้นและตัวผู้ป่วยเองจะกลายเป็นอันตรายในแง่ของการติดเชื้อกับผู้ติดต่อ ผู้ติดเชื้อสามารถระบุตัวได้หลังจากระยะเวลาที่สั้นลง (1 - 2 สัปดาห์) หลังการติดเชื้อ ซึ่งจะใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR) แต่เนื่องจากมีค่าใช้จ่ายสูง ประเภทนี้ไม่ใช้การศึกษาแบบคัดกรอง

เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์สำหรับการวินิจฉัยเอชไอวี

ใน 90 - 95% ของผู้ติดเชื้อแอนติบอดีปรากฏในซีรั่มในเลือด 3 เดือนหลังการติดเชื้อ ในสัดส่วนเล็กน้อยของผู้ป่วย (5 - 9%) แอนติบอดีจะปรากฏในช่วง 3 ถึง 9 เดือนและใน 0.5 - 1% - ใน มากกว่า วันที่ล่าช้า. ในระยะสุดท้ายของโรคเอดส์ จำนวนแอนติบอดีจะลดลงอย่างมาก และในบางกรณีก็หายไปโดยสิ้นเชิง

ตั้งแต่ปี 1985 เทคนิคนี้ถูกนำมาใช้ในสหพันธรัฐรัสเซียเพื่อวัตถุประสงค์ในการวิจัยจำนวนมาก ใช้งานง่าย แสดงผลลัพธ์ได้ค่อนข้างแม่นยำ และราคาถูกเมื่อเทียบกับวิธีอื่นๆ เนื่องจากมีความเป็นไปได้ที่จะได้ผลลัพธ์ที่เป็นเท็จ ผลบวกทั้งหมดจะถูกตรวจสอบสองครั้ง หลังจากนั้นซีรั่มในเลือดของผู้ป่วยจะถูกตรวจสอบด้วยการทดสอบเพื่อยืนยัน - อิมมูโนล็อต นี่ใช้ตัวอย่างเลือดเดียวกัน หากมีผลบวก 2 รายการโดยใช้ ELISA และ Immunoblot ในหนึ่งตัวอย่าง จะทำการวินิจฉัยการติดเชื้อ HIV

ในสหพันธรัฐรัสเซีย มักใช้ ELISA รุ่นที่ 4 การศึกษาดำเนินการเพื่อให้ได้สเปกตรัมรวมของแอนติบอดีต่อโปรตีน HIV (แอนติเจน) - p24 และ gp160

การทดสอบจะเห็นทั้งแอนติบอดีที่ผลิตโดยร่างกายของผู้ป่วยและแอนติเจน p24 (โปรตีนของไวรัส) กรอบเวลาสำหรับการทดสอบรุ่นที่ 4 นั้นสั้นกว่า ภายในหนึ่งเดือนคุณจะได้รับผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้ อย่างไรก็ตาม ผู้เชี่ยวชาญด้านสุขภาพของรัสเซียระบุว่า ระยะเวลา 6, 8 หรือ 12 สัปดาห์มีความน่าเชื่อถือมากกว่า

ข้าว. 8. ภาพถ่ายแสดงเครื่องวิเคราะห์เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์

ข้าว. 9. ภาพถ่ายแสดงเครื่องวิเคราะห์เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์อัตโนมัติ

ในการตรวจเบื้องต้นเป็นกลุ่มบุคคลเพื่อตรวจหาการติดเชื้อเอชไอวีจะใช้วิธี ELISA เท่านั้น

วิธีการอิมมูโนล็อตติง

วิธีอิมมูโนลอตต์มีความแม่นยำมากกว่า ELISA ผู้เชี่ยวชาญส่วนใหญ่ระบุว่าเป็นวิธีอ้างอิง ด้วยความช่วยเหลือ แอนติบอดีต่อโปรตีน HIV จะถูกตรวจพบในเลือด เทคนิคนี้ใช้เพื่อยืนยันผลลัพธ์ที่ได้รับระหว่างการตรวจ ELISA มีความจำเพาะสูง ผลบวกลวงนั้นหาได้ยาก ความน่าเชื่อถือของผลลัพธ์ที่ได้รับถึง 99% การฉีดอิมมูโนล็อตติงเป็นเทคนิคที่มีราคาแพงและต้องอาศัยความเชี่ยวชาญเฉพาะทางสูงจากผู้เชี่ยวชาญที่ทำการศึกษา อาจได้รับผลลัพธ์ที่น่าสงสัย

วิธีการนี้ขึ้นอยู่กับการแยกแอนติเจน (โปรตีน) ของ HIV โดยใช้อิเล็กโทรโฟเรซิสโดยพิจารณาจากน้ำหนักโมเลกุล แอนติบอดีต่อโปรตีน capsid เป็นสิ่งแรกที่ตรวจพบในระหว่างการติดเชื้อ ปิดปาก"(p24 และ p17) และสารตั้งต้น p55 แอนติบอดีต่อโปรตีน supercapsid จะปรากฏขึ้นตามมา สิ่งแวดล้อม"(ไกลโคโปรตีน gр 160, gр120, gр41 และโปรตีน р88) และโปรตีนที่ไม่ใช่โครงสร้าง "Pol" (р31, р51 และ р66) ในบางกรณีสามารถตรวจพบแอนติบอดีต่อยีนได้” วีพียู», « วีพีอาร์», « วิฟ», « ททท», « เนฟ», « รายได้», « ททท».

ซีรั่มในเลือดของผู้ป่วย HIV-1 และ HIV-2 มีแอนติบอดีต่อโปรตีนของไวรัสทั้งหมด แต่เพื่อยืนยันการวินิจฉัยจะตรวจพบเฉพาะแอนติบอดีต่อโปรตีน p24, gp41, gp120 และ gp160 ใน HIV-1 และแอนติบอดีต่อโปรตีน gp105 gp140 และ gp140 ใน HIV-2 gr36

หากมีผลบวก 2 รายการโดยใช้ ELISA และ Immunoblot ในหนึ่งตัวอย่าง จะทำการวินิจฉัยการติดเชื้อ HIV

ข้าว. 10. เครื่องมือในการทำวิจัยอิมมูโนล็อต

ข้าว. 11. การวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีทำได้โดยมีผลบวก 2 รายการ โดยใช้วิธี ELISA และอิมมูโนลอตในตัวอย่างเดียว

ระบบทดสอบสำหรับการนับจำนวนเซลล์เม็ดเลือดขาว CD4

การทดสอบทางภูมิคุ้มกันอย่างหนึ่งที่ใช้สำหรับการติดเชื้อเอชไอวีคือวิธีการนับเม็ดเลือดขาวลิมโฟไซต์ CD4 และ CD8 ในเลือด

เซลล์เม็ดเลือดขาว CD4 (เซลล์ทีเฮลเปอร์)ได้รับผลกระทบจากไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่อง การพร่องของประชากรอย่างค่อยเป็นค่อยไปทำให้ภูมิคุ้มกันลดลงและร่างกายของผู้ป่วยหยุดต้านทานการติดเชื้อ การนับจำนวนเซลล์เม็ดเลือดขาว CD4 ดำเนินการโดยโฟลว์ไซโตเมทรีโดยใช้เครื่องวิเคราะห์อัตโนมัติหรือด้วยตนเองโดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงหรือฟลูออเรสเซนซ์ จำนวนเซลล์เม็ดเลือดขาว CD4 กำหนดเวลาในการเริ่มการรักษาเฉพาะ (การรักษาด้วยยาต้านไวรัส) และการป้องกันการติดเชื้อฉวยโอกาส และประเมินประสิทธิผลของการรักษา

• เมื่อจำนวนเซลล์เม็ดเลือดขาว CD4 ในซีรั่มในเลือดเท่ากับ 500 หรือน้อยกว่าต่อ 1 มิลลิลิตร บ่งชี้ถึงการพัฒนาของภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่อง
• เมื่อจำนวนเซลล์เม็ดเลือดขาว CD4 ลดลงเหลือ 200 ต่อ 1 มิลลิลิตร (ค่าปกติคือจาก 600 ถึง 1900 เซลล์ต่อ 1 มิลลิลิตร) กลุ่มอาการภูมิคุ้มกันบกพร่องที่ได้มา (AIDS) จะพัฒนาขึ้น
• เมื่อระดับของเซลล์เม็ดเลือดขาว CD4 ลดลงเหลือ 50 หรือต่ำกว่าต่อ 1 ไมโครลิตร โรคเอดส์จะเข้าสู่ระยะสุดท้าย

สัดส่วนของลิมโฟไซต์ CD4 ในบรรดาลิมโฟไซต์ทั้งหมดปกติประมาณ 40% อัตราที่ลดลงเหลือ 20% บ่งชี้ถึงการพัฒนาของโรคเอดส์

ซีดี8 ลิมโฟไซต์(T-killers ในภาษาอังกฤษ. นักฆ่า- killer) ทำลายไวรัส เอชไอวีโดยไซโตไลซิส การแพร่กระจาย (เพิ่มจำนวน) ขึ้นอยู่กับกิจกรรมของเซลล์ทีเฮลเปอร์ ในระหว่างการติดเชื้อ HIV จำนวนเซลล์เม็ดเลือดขาว CD4 และ CD8 จะลดลง แต่ระดับของเซลล์เม็ดเลือดขาว CD4 จะลดลงส่วนใหญ่ อัตราส่วน CD4/CD8 ปกติคือ 1.5 - 2.5 เมื่อจำนวนเซลล์เม็ดเลือดขาว CD4 ลดลงจะพบว่าดัชนีลดลง

ค่าของมันน้อยกว่า 1 บ่งชี้ถึงภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่องที่พัฒนาแล้ว ด้วยอัตราส่วน 0.6 - 0.8 เอดส์จะพัฒนา

เมื่อได้รับผลการตรวจเป็นบวก บุคคลนั้นจะต้องลงทะเบียนด้วย หน่วยงานของรัฐศูนย์ป้องกันและควบคุมโรคเอดส์ โดยจะมีการติดตามอาการและกำหนดวิธีการรักษาเฉพาะอย่างเพียงพอ

ข้าว. 12. ในภาพ เครื่องวิเคราะห์การไหลอัตโนมัติใช้เพื่อนับจำนวนเซลล์เม็ดเลือดขาว CD4 ในเลือดของบุคคลที่กำลังศึกษา

การตรวจเอชไอวีโดยใช้ PCR

แพร่หลายมากขึ้นใน ปีที่ผ่านมาได้รับวิธีอณูพันธุศาสตร์เพื่อวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวี - ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR) ด้วยความช่วยเหลือ สารพันธุกรรมของเชื้อโรคจะถูกกำหนด - RNA - แล้ว 1 - 2 สัปดาห์หลังจากการติดเชื้อที่ถูกกล่าวหา และความไวสูงของการทดสอบทำให้สามารถตรวจจับไวรัส RNA ได้แม้ว่าจะมีเพียงไม่กี่ตัวในการทดสอบ วัสดุ. เทคนิคนี้มีราคาแพงจึงไม่ได้ใช้ในการคัดกรองในปัจจุบัน นอกจากนี้ ปัญหาสำคัญในการศึกษานี้คือความเป็นไปได้ที่จะได้ผลลัพธ์ที่เป็นบวกลวง

สาระสำคัญของเทคนิค PCR สำหรับเอชไอวี

สาระสำคัญของเทคนิคนี้คือการได้รับสำเนาของไวรัส RNA (กรดนิวคลีอิก) หลายสำเนา ซึ่งต่อมาจะถูกระบุทั้งโดยโครงสร้างลักษณะเฉพาะและด้วยความช่วยเหลือของเอนไซม์หรือไอโซโทปที่มีป้ายกำกับ

ความเป็นไปได้ของ PCR สำหรับการติดเชื้อ HIV

กับ โดยใช้พีซีอาร์สามารถแก้ไขได้ ผลลัพธ์ที่น่าสงสัยได้โดยใช้เทคนิคอิมมูโนลอตต์ วินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีในระยะแรก (เร็วที่สุด 1-2 สัปดาห์หลังสงสัยว่าติดเชื้อ) ติดตามประสิทธิผลของการรักษาด้วยยาต้านไวรัส และกำหนดระยะของโรค

ข้าว. 13. ในภาพด้านซ้ายคือ T-lymphocyte ปกติ ทางด้านขวาคือ T-lymphocyte ที่ติดเชื้อ HIV มองเห็นฟองอากาศหลายฟองระหว่างนั้นซึ่งมีไวรัสที่ก่อตัวใหม่ (รูปแบบโค้งมนเล็ก) ปรากฏขึ้น การใช้ PCR จะตรวจพบการติดเชื้อ HIV ภายใน 1 - 2 สัปดาห์หลังจากสงสัยว่าติดเชื้อ

ข้อดีของเทคนิค PCR สำหรับเอชไอวี

• การใช้ PCR ทำให้สามารถตรวจจับไวรัสและปริมาณของไวรัสได้
• ความเป็นไปได้ในการใช้งานในเด็กอายุต่ำกว่าหนึ่งปีครึ่ง
• ประเมินประสิทธิผลของการรักษา
• กำหนดความรุนแรงและการพยากรณ์โรค

ข้อเสียของเทคโนโลยี PCR สำหรับเอชไอวี

• ค่าใช้จ่ายในการวิจัยสูง
• ความพร้อมของห้องปฏิบัติการเฉพาะทาง
• ระยะเวลาในการรับผลลัพธ์ (สูงสุด 4 สัปดาห์)

ใครต้องการ PCR?

1. รับผลภายใน 7-10 วัน สำหรับบุคคลที่สงสัยว่าติดเชื้อ เมื่อต้องการผลในระยะเวลาอันสั้น
2. เพื่อกำหนดวันเริ่มต้นและประเมินประสิทธิผลของการรักษา
3. PCR จะทำกับหญิงตั้งครรภ์ที่ติดเชื้อ 4 สัปดาห์ก่อนเกิด เพื่อตัดสินใจเลือกใช้การผ่าตัดคลอด
4. ทารกแรกเกิดจากมารดาที่ติดเชื้อ ผลบวกที่ได้รับสองครั้งบ่งชี้ว่าเด็กติดเชื้อ

ภายใต้สภาวะปกติสำหรับการคัดกรองและวินิจฉัย PCR ติดเชื้อเอชไอวีไม่ได้ใช้

RNA PCR และ DNA PCR อะไรคือความแตกต่าง

• RNA PCR พิสูจน์ว่ามีไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องในเลือดและปริมาตรของ RNA ที่ตรวจพบ การศึกษานี้ใช้ในบุคคลที่ได้รับการวินิจฉัยเพื่อประเมินประสิทธิผลของการรักษา
• การใช้ DNA PCR การปรากฏตัวของไวรัสในเซลล์โมโนนิวเคลียร์ในเด็กจะถูกกำหนดเมื่อแอนติบอดีต่อไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ในแม่ป้องกันการใช้วิธีการ ELISA

ปริมาณไวรัสจะถูกกำหนดโดยการนับจำนวนสำเนา RNA ในพลาสมาเลือด 1 มิลลิลิตร ทำให้สามารถระบุระยะของโรค วิเคราะห์การรักษาเฉพาะที่จัดให้ และกำหนดความรุนแรงและการพยากรณ์โรคได้ ยิ่งปริมาณไวรัสสูง เซลล์เม็ดเลือดขาว CD4 จะถูกบันทึกไว้ในพลาสมาน้อยลง

การตีความผลลัพธ์:

• ตรวจไม่พบ RNA หรือจำนวนสำเนา RNA น้อยกว่า 20 ต่อมิลลิลิตร พลาสมา
• ตรวจพบ RNA ที่ขีดจำกัดความไว - น้อยกว่า 20 ชุด/มล.
• RNA ตั้งแต่ 20 ถึง 10 6 สำเนาในพลาสมาเลือด 1 มล. บ่งบอกถึงความน่าเชื่อถือของผลลัพธ์
• สำเนา RNA ที่มากกว่า 10 6 มล. เป็นขีดจำกัดบนของช่วงเชิงเส้น

การเพิ่มขึ้นของปริมาณไวรัสในผู้ป่วยที่ติดเชื้อ HIV สามครั้งขึ้นไปถือเป็นผลลัพธ์ที่มีนัยสำคัญทางคลินิก

การติดตามปริมาณไวรัสจะดำเนินการทุกๆ 3 เดือนในผู้ป่วยที่ยังไม่ได้รับการรักษา หากเริ่มการรักษาด้วยยาต้านไวรัส การควบคุมจะดำเนินการหลังจาก 2-8 สัปดาห์

ข้าว. 14. PCR ได้รับความนิยมมากขึ้นในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา

ข้าว. 15. แอมพลิฟายเออร์สำหรับ PCR

การทดสอบเอชไอวีจะต้องดำเนินการในระยะแรกของการติดเชื้อและเป็นระยะ ๆ ในระหว่างที่เกิดโรคซึ่งจะช่วยให้มั่นใจได้ว่าจะได้รับการรักษาด้วยยาต้านไวรัสอย่างทันท่วงทีเพื่อป้องกันการพัฒนากระบวนการติดเชื้อและเนื้องอกที่เป็นอันตราย

การเพาะเลี้ยงไวรัส

ไวรัส, RNA, DNA, แอนติเจนและแอนติบอดีสามารถตรวจพบได้ไม่เพียงแต่ในซีรั่มในเลือดเท่านั้น แต่ยังตรวจพบในอสุจิ น้ำลาย เนื้อหาในช่องคลอด ฯลฯ อีกด้วย เอชไอวีได้รับการปลูกฝังในการเพาะเลี้ยงเซลล์เม็ดเลือดขาว เทคนิคนี้มีความไวสูงและเฉพาะเจาะจง (มากถึง 100%) แต่การศึกษาที่มีต้นทุนสูงไม่อนุญาตให้นำไปใช้ในงานห้องปฏิบัติการทุกวัน

ตรวจเลือดหาเชื้อ HIV อย่างสมบูรณ์

อันเป็นผลมาจากความเสียหายต่ออวัยวะเม็ดเลือดโดยไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์การยับยั้งการสร้างเม็ดเลือดจะเกิดขึ้นซึ่งแสดงออกโดยการลดจำนวนของเซลล์เม็ดเลือดขาว (lymphopenia) นิวโทรฟิล (neutropenia) เกล็ดเลือด (thrombopenia) และโรคโลหิตจาง นอกจากนี้ การทำลายจำนวนเซลล์ยังได้รับอิทธิพลจากกระบวนการแพ้ภูมิตัวเองที่เกิดขึ้นในผู้ป่วยที่ติดเชื้อ HIV อิมมูโนโกลบูลินของ IgG มีอิทธิพลเหนือซีรั่มในเลือดของผู้ป่วย

ข้าว. 16. นำเลือดจากหลอดเลือดดำและนิ้วไปทดสอบ

ทุกวันนี้ ใครๆ ก็สามารถตรวจ HIV โดยไม่เปิดเผยตัวตนและไม่มีค่าใช้จ่ายได้ภายในเวลาไม่กี่นาที และอุปกรณ์ที่ทันสมัยและบุคลากรที่ได้รับการฝึกอบรมจะช่วยให้คุณได้รับผลลัพธ์ที่แม่นยำที่สุด

การตรวจเอชไอวีแบบด่วน (เฉพาะจุด) หรือแบบรวดเร็วสามารถทำได้นอกห้องปฏิบัติการเฉพาะทาง โดยไม่ต้องใช้อุปกรณ์ใดๆ และทราบผลภายในเวลาสูงสุด 30 นาที อย่างไรก็ตามผู้เชี่ยวชาญบางคนอ้างถึง วิธีนี้การวินิจฉัยยังไม่เป็นที่เชื่อ โดยสังเกตความน่าเชื่อถือและความแม่นยำของการตรวจ HIV อย่างรวดเร็ว

ข้อบ่งชี้ในการตรวจเอชไอวีอย่างรวดเร็วและต้องทำอย่างไร

ข้อบ่งชี้หลักสำหรับการตรวจเอชไอวีอย่างรวดเร็วซึ่งสามารถตรวจพบการติดเชื้อที่บ้าน ได้แก่ กรณีที่เกี่ยวข้องกับความเสี่ยงที่เพิ่มขึ้นของการติดเชื้อ:

• หลังจากการถ่ายเลือดอย่างเร่งด่วน (ไม่ได้วางแผน)
• ในกรณีที่มีความรุนแรงทางเพศหรือ การติดต่อทางเพศกับพาหะของไวรัสนี้
• เมื่อบุคลากรทางการแพทย์สัมผัสเลือดของผู้ป่วยเอดส์ (ระหว่างขั้นตอนการวินิจฉัยหรือการผ่าตัด)

ความจำเป็นในการ การทดสอบนี้เกิดขึ้นหากผู้ป่วยบ่นว่าน้ำหนักลดอย่างไม่มีสาเหตุอย่างมีนัยสำคัญหรือมีไข้ที่ไม่หายไปเป็นเวลานาน (และแพทย์ที่เข้ารับการรักษาพบว่าต่อมน้ำเหลืองโต)

สามารถทำการทดสอบรวมทั้งการทดสอบแบบรวดเร็วได้ภายใน 3 เดือนหลังจากสงสัยว่าติดเชื้อ การทดสอบซ้ำจะดำเนินการทุกๆ 3 เดือนเป็นเวลา 1 ปี

การทดสอบอย่างรวดเร็วแบบรวดเร็วจะใช้เมื่อการวิเคราะห์นี้ไม่สามารถทำได้เนื่องจากไม่มีห้องปฏิบัติการเฉพาะทาง

นอกจากนี้ การทดสอบเอชไอวีอย่างรวดเร็วยังใช้ในการคัดกรองกลุ่มเสี่ยงเพื่อวัตถุประสงค์ในการเฝ้าระวังประชากรบางประเภทที่มีโอกาสติดเชื้อไวรัสนี้เพิ่มขึ้น ในกรณีนี้ เช่นเดียวกับการติดต่อศูนย์ป้องกันโรคเอดส์ใดๆ ก็ตาม การตรวจเอชไอวีแบบรวดเร็วจะดำเนินการโดยไม่คิดค่าใช้จ่าย

ฉันจะตรวจ HIV อย่างรวดเร็วได้ที่ไหน?

เพื่อตรวจหาไวรัสและแอนติบอดีต่อโรคภูมิคุ้มกันบกพร่อง มีห้องปฏิบัติการเฉพาะทางสำหรับวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีที่มีสิทธิ์ทำการศึกษาเหล่านี้และได้รับการรับรองที่เหมาะสม

การตรวจเอชไอวีอย่างรวดเร็วในร้านขายยา

คุณสามารถซื้อชุดตรวจ HIV แบบด่วนได้ที่ร้านขายยา ซึ่งส่วนใหญ่มักเสนอ:

• Cito test HIV 1/2 (Pharmasco), Vikia HIV 1/2 (BioMerieux) - การตรวจทางอิมมูโนโครมาโตกราฟีอย่างรวดเร็ว (ICA) ที่กำหนดการมีอยู่ของแอนติบอดีต่อ HIV ประเภท 1 และ 2 ในเลือด, ซีรั่มและพลาสมา;
• การทดสอบอย่างรวดเร็วสำหรับ HIV ในน้ำลาย - OraQuick HIV-1/2 Rapid Antibody Test หรือการทดสอบอย่างรวดเร็วสำหรับ HIV OraQuick Advance (ความไวมากกว่า 94%); ผู้ผลิต – OraSure Technologies (สหรัฐอเมริกา) หลายคนเรียกมันว่าการทดสอบเอชไอวีแบบด่วนที่บ้านเพราะในการดำเนินการคุณไม่จำเป็นต้องนำเลือดจากหลอดเลือดดำ (เช่นเดียวกับที่ทำในห้องปฏิบัติการ) หรือจากนิ้ว (โดยการเจาะด้วยเครื่องขูด - เช่นเดียวกับเมื่อทำ Cito ทดสอบ HIV 1/2) เนื่องจากน้ำลายของวัสดุชีวภาพใช้ในการตรวจสอบการมีหรือไม่มีไวรัส
• การทดสอบอย่างรวดเร็วสำหรับ HIV Abon Biopharm – Abon HIV 1/2/0 Tri-Line Rapid Test (ผู้ผลิต – Abon Biopharm Hangzhou Co., China)

ไม่จำเป็นต้องมีการเตรียมตัวเป็นพิเศษสำหรับการทดสอบแบบรวดเร็วดังกล่าว และวิธีใช้การทดสอบ HIV แบบรวดเร็วนั้นมีอธิบายรายละเอียดไว้ในแพ็คเกจที่มาพร้อมกับชุดทดสอบเฉพาะ คำแนะนำทีละขั้นตอนซึ่งควรปฏิบัติตามอย่างเคร่งครัด

การทดสอบ HIV แบบรวดเร็วรุ่นที่ 4 - ตัวอย่างเช่น OnSite HIV Ag/Ab Rapid Test (CTK Biotech Inc.) หรือ HIV-1/2 Ag/Ab Combo Rapid Test - ชุดวินิจฉัยสำหรับการตรวจอิมมูโนแอสเสย์แบบรวมของซีรั่ม พลาสมา หรือเลือดครบส่วนสำหรับแอนติเจน HIV -1 p24 รวมถึงแอนติบอดี (IgG, IgM, IgA) ต่อเอชไอวีทั้งสองประเภท จนถึงปัจจุบัน ความคิดเห็นของแพทย์เกี่ยวกับการทดสอบแบบรวดเร็วประเภทนี้ขัดแย้งกัน และเห็นได้ชัดว่าผลลัพธ์ของพวกเขาค่อนข้างแตกต่างจากข้อมูลการวิจัยในห้องปฏิบัติการ

การตรวจ HIV อย่างรวดเร็วจะเชื่อถือได้หรือไม่?

ในเรื่องนี้ คำถามทั่วไปเกิดขึ้นเกี่ยวกับค่าการวินิจฉัยของผลการศึกษาประเมินผลที่ดำเนินการโดยใช้ระบบการวินิจฉัยเพื่อการตรวจหาไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องอย่างรวดเร็ว

ตามข้อมูลจากผู้ผลิตความน่าเชื่อถือและความแม่นยำของการทดสอบเอชไอวีแบบรวดเร็วนั้นกำหนดไว้ที่ระดับ 99-99.5% แต่จากการวิจัยพบว่าตัวเลขนี้อาจต่ำกว่ามาก

ในปัจจุบัน ผลลัพธ์ที่น่าเชื่อถือที่สุดของการทดสอบเอชไอวีแบบรวดเร็วนั้นมาจากการทดสอบอิมมูโนโครมาโตกราฟี เมื่อมองเห็นบรรทัดหนึ่งบนตัวบ่งชี้ - เส้นควบคุม การทดสอบ HIV แบบรวดเร็วจะเป็นลบ ผลปฏิกิริยานั่นคือ การทดสอบอย่างรวดเร็วผลบวกสำหรับเอชไอวี (เมื่อตัวบ่งชี้มีสองบรรทัด - สีและการควบคุม) ผู้เชี่ยวชาญทุกคนถือเป็นเบื้องต้นและจำเป็นต้องได้รับการทดสอบซ้ำ - การวิจัยในห้องปฏิบัติการที่ใช้วิธีการอื่นที่แม่นยำกว่าโดยเฉพาะ

หากทำการทดสอบไม่ถูกต้อง ตัวบ่งชี้อาจแสดงเพียงแถบเดียว (โดยไม่มีตัวควบคุม) ซึ่งถือได้ว่าเป็นข้อผิดพลาด จากนั้นแนะนำให้ทดสอบอีกครั้งด้วยชุดอุปกรณ์ใหม่ ทางเลือกหนึ่งในการยืนยันผลลัพธ์ที่เกิดปฏิกิริยาคือทำการทดสอบด่วนครั้งที่สองจากผู้ผลิตรายอื่นทันที หากการทดสอบครั้งที่สองไม่มีปฏิกิริยา ก็สามารถสันนิษฐานได้ว่าบุคคลนั้นไม่ติดเชื้อ แต่เมื่อผลตรวจครั้งที่สองเป็นบวกก็มีแนวโน้มว่าจะมีการติดเชื้อเกิดขึ้น

ควรเน้นย้ำอีกครั้งว่าผลลัพธ์เชิงบวกทั้งหมดของการทดสอบประเมินผลอย่างรวดเร็ว โดยเฉพาะอย่างยิ่งหากใช้การทดสอบ HIV น้ำลายอย่างรวดเร็วของ OraQuick จะต้องได้รับการยืนยัน (หรือหักล้าง) โดยการตรวจเลือดในห้องปฏิบัติการเฉพาะทาง

เอชไอวีคือหายนะของคนรุ่นเรา มีวิธีการวินิจฉัย HIV อย่างไร เจาะลึกการตรวจ ELISA สำหรับ HIV ทำอย่างไร ตีความผลการวิเคราะห์อย่างไร

ไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์เป็นหนึ่งในการติดเชื้อที่เลวร้ายที่สุดสำหรับคนรุ่นของเรา

เอชไอวีมีผลทำลายต่อระบบภูมิคุ้มกันของเราและหากการดำเนินของโรคยังไม่หยุดทันเวลา อาจเปลี่ยนเป็นกลุ่มอาการภูมิคุ้มกันบกพร่องได้. เอชไอวีแพร่กระจายผ่านการสัมผัสโดยตรงระหว่างคู่รักระหว่างมีเพศสัมพันธ์ผ่านทางอวัยวะเพศชายและหญิง สาเหตุของการติดเชื้ออีกประการหนึ่งอาจเป็นเพราะไวรัสเข้าสู่กระแสเลือด สิ่งนี้เกิดขึ้นเนื่องจากการใช้เครื่องมือที่ไม่ผ่านการฆ่าเชื้อ การถ่ายเลือดที่ปนเปื้อน และแม้กระทั่งข้ามรุ่นไปยังเด็กจากแม่ที่ติดเชื้อระหว่างให้นมลูก

จนถึงขณะนี้ นักวิทยาศาสตร์ทั่วโลกกำลังใช้สมองอย่างหนักเพื่อสร้างยารุ่นใหม่ที่สามารถรักษาโรคเอดส์ได้ อย่างไรก็ตาม แม้จะมีความก้าวหน้าทางวิทยาศาสตร์อย่างรวดเร็ว แต่ไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องในมนุษย์ยังคงแพร่กระจายไปทั่วโลก

ELISA – วิธีการวินิจฉัยเอชไอวี

นักวิทยาศาสตร์แห่งศตวรรษที่ 20 ได้พัฒนาวิธีการวินิจฉัยเอชไอวีหลายวิธีซึ่งถือว่าสำคัญที่สุด การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยง HIV ELISA เริ่มดำเนินการเมื่อไม่นานมานี้ - ในช่วงต้นยุค 90 เมื่อเวลาผ่านไป วิธีการนี้ได้รับการปรับปรุงและได้รับรายละเอียดใหม่ ขณะนี้ความน่าเชื่อถือของวิธี ELISA เป็นหนึ่งในวิธีที่สูงที่สุด - ประมาณ 98% ดังนั้นจึงมีการใช้วิธีนี้บ่อยขึ้นเรื่อย ๆ

ELISA คือการทดสอบแรกที่ผู้ป่วยพบเมื่อตรวจหาเชื้อ HIV วิธี ELISA ตรวจหาการมีอยู่ของแอนติบอดีในเลือด หากการทดสอบพบว่ามีแอนติบอดีในเลือด แสดงว่าไวรัสนั้นมีอยู่ อย่างไรก็ตาม ข้อมูลเกี่ยวกับการทดสอบนี้ต้องได้รับการสนับสนุนจากการทดสอบอื่นๆ เช่น อิมมูโนลอตต์ (IB) และวิธีการรุ่นล่าสุด - ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR)

แอนติบอดีเป็นสารประกอบโปรตีนพิเศษที่ผลิตโดยเซลล์พลาสมาเพื่อตอบสนองต่อการติดเชื้อเข้าสู่ร่างกาย (แอนติบอดีเริ่มก่อตัวใน 1-2 เดือนหลังการติดเชื้อ)

สาเหตุของเอชไอวี

แพทย์ของคุณจะเขียนจดหมายถึงคุณเพื่อทำการทดสอบ หากคุณได้ติดต่อกับผู้ที่ติดเชื้อ HIV หรือมีความเสี่ยงต่อการติดเชื้อ รุ่นที่มีความเสี่ยงต่อการติดเชื้อเอชไอวี ได้แก่ :

• เข้ารับการฉีดยาเป็นเวลาหนึ่งเดือน
• การมีเพศสัมพันธ์โดยปราศจาก วิธีพิเศษการป้องกัน;
• พาหะของการติดเชื้อที่ติดต่อระหว่างการมีเพศสัมพันธ์
• ผู้ป่วยหลังการถ่ายเลือดหรือฉีดเลือดเพื่อค้นหาสาเหตุของการแข็งตัวของเลือดในยุค 80

หากคุณมีข้อสงสัยเกี่ยวกับสถานะเอชไอวีของคุณและกังวลเกี่ยวกับความเป็นไปได้ในการติดเชื้อ ขอแนะนำให้คุณขอความช่วยเหลือจากสถาบันทางการแพทย์ในประเทศของเราทันทีเพื่อทำการตรวจเอชไอวีแบบครอบคลุม ผลการทดสอบจะได้รับภายในหนึ่งเดือน แนะนำให้ผู้ที่มีความเสี่ยงต่อการติดเชื้อ HIV ได้รับการตรวจทุก 4 เดือน

วิธีเข้ารับการทดสอบ

ไม่จำเป็นต้องเตรียมตัวเป็นพิเศษในการตรวจเลือดหาเชื้อ HIV แต่จะดีกว่า ปฏิบัติตามกฎที่ง่ายที่สุด:

• เป็นการดีกว่าที่จะไม่กินในตอนเย็น แต่ควรทำแบบทดสอบในขณะท้องว่างในตอนเช้า
• ไม่แนะนำให้ร่างกายทำงานหนักเกินไป
• ใช้ อาหารสุขภาพงดบุหรี่และแอลกอฮอล์สักพัก
• หากต้องการยกเว้นผลการทดสอบที่ผิดพลาด คุณไม่ควรทำการทดสอบหลังการรักษาโรคร้ายแรง

มีหลายแบบ การตรวจ HIV PCR นี่แหละที่สมควรได้รับ ความสนใจเป็นพิเศษ. ขึ้นอยู่กับข้อเท็จจริงที่ว่ามันพบสารพันธุกรรมของเชื้อโรค วิธีนี้ช่วยลดข้อผิดพลาดที่เกือบจะรับประกันได้ ในอดีตเทคนิคนี้มีจุดมุ่งหมายเพื่อจุดประสงค์เดียวเท่านั้น วิธีการทางวิทยาศาสตร์แต่ก็พบว่ามีประโยชน์

การตรวจหาเชื้อ HIV ใช้เวลานานแค่ไหน?หากคุณสงสัยว่ามีการติดเชื้อ? ความแตกต่างอยู่ที่ประสิทธิภาพอย่างแม่นยำ ดังนั้นการวิเคราะห์ดังกล่าวจึงสามารถกำหนดได้ในระยะแรกของการพัฒนาของโรค หากผู้ป่วยที่มีศักยภาพมาพบแพทย์ทันทีหลังจากการติดเชื้อที่เป็นไปได้และยังไม่มีสัญญาณของไวรัส จะมีการกำหนดให้ทำการทดสอบ PCR มันใช้งานได้ตั้งแต่วันที่สี่ของการมีไวรัสในเลือด เพื่อความถูกต้องแม่นยำ แนะนำให้ทำการทดสอบประมาณ 14 วันหลังจากเกิดปฏิกิริยาที่เป็นอันตราย

ความน่าเชื่อถือของ HIV PCR หลังจาก 2 สัปดาห์เป็นเท่าใด?? ตามที่ได้กำหนดไว้ ความน่าเชื่อถือในการพิจารณาการมีอยู่ของไวรัสโดยวิธีปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสยังเป็นที่น่าสงสัยอย่างมาก ตั้งแต่ทศวรรษที่ 80 ของศตวรรษที่ผ่านมา การทดสอบเฉพาะนี้มีการใช้กันอย่างแพร่หลายและถือว่าเป็นหนึ่งในการทดสอบที่แม่นยำที่สุด ผู้พัฒนาได้รับ รางวัลโนเบล. ผู้ได้รับรางวัลเล็งเห็นถึงคำมั่นสัญญาของการเกิดพอลิเมอไรเซชันในยุคนั้น

ที่มาของการวิเคราะห์ PCR

วันเดือนปีเกิดสามารถระบุได้ในปี 1983 วิธีการนี้ขึ้นอยู่กับการแยกส่วนของสายนิวคลีโอไทด์จากต่างประเทศซึ่งอาจเป็นได้ทั้งกรดไรโบนิวคลีอิกหรือกรดดีออกซีไรโบนิวคลีอิกโดยการแพร่กระจายแบบเทียมและศึกษามัน ผู้เชี่ยวชาญด้าน PCR นำ DNA ของ HIV และเพิ่มจำนวนตามหลักการเสริมกัน และสร้างค่อนข้างมาก โซ่ยาวซึ่งสะดวกในการพิจารณาและทดสอบ HIV RNA PCR ดำเนินการในลักษณะเดียวกันโดยรับเฉพาะพลาสมาหรือซีรั่มเท่านั้น

การเกิดขึ้นของแนวปฏิบัตินี้ในวงกว้างถือเป็นความก้าวหน้าอย่างแท้จริง และทำให้สามารถก้าวสำคัญในการช่วยเหลือผู้ป่วยได้ ดังนั้นจึงเป็นไปได้ที่จะช่วยเหลือผู้คนในระยะแรกสุดในการตรวจหาโรคก่อนที่จะมีแอนติบอดีจำเพาะปรากฏ นับจากวันนี้ในประวัติศาสตร์การแพทย์ เอชไอวีไม่ใช่โทษประหารชีวิตอีกต่อไป

PCR การวินิจฉัยเอชไอวี

หากต้องการศึกษาโดยใช้วิธีปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส คุณจะต้องใช้วัสดุติดเชื้อเพียงเล็กน้อย จึงสามารถวินิจฉัยได้อย่างรวดเร็วและทันที

PCR การวินิจฉัยเอชไอวีถูกต้องแม่นยำต้องอาศัยคุณวุฒิระดับอัจฉริยะจากผู้ปฏิบัติงานที่ทำวิจัย สิ่งอำนวยความสะดวกในห้องปฏิบัติการที่ทันสมัยจะตรวจสอบข้อมูลที่ได้รับหลายครั้งก่อนที่จะรายงานผลไปยังผู้สมัคร

การวินิจฉัย การติดเชื้อเอชไอวีพีซีอาร์วิธีการจะใช้เวลาหนึ่งวันหรือหลายวัน ขึ้นอยู่กับปริมาณงานของเจ้าหน้าที่

มีเงื่อนไขบางประการสำหรับผู้สอบที่จะได้รับคำตอบตามความเป็นจริงมากที่สุด:

• อย่ากินเป็นเวลา 8-10 ชั่วโมง เว้นแต่จะมีข้อห้าม
• เลิกดื่มแอลกอฮอล์ในสองสามวัน
• อย่าฝึกออกกำลังกายแบบกีฬาเมื่อวันก่อน

นี่คือทั้งหมดที่เป็นวิชาที่ต้องทำ ที่เหลือก็ขึ้นอยู่กับคนทำงานด้านสุขภาพ ความปลอดเชื้อในห้องจะต้อง 100% มีการตรวจสอบห้องปฏิบัติการอ้างอิงของศูนย์ชั้นนำอย่างสม่ำเสมอเพื่อให้มั่นใจถึงความสะอาดและความสามารถในการให้บริการของเครื่องฆ่าเชื้อ PCR ใช้เพื่อยืนยันการวินิจฉัยและการนับอนุภาคไวรัสในเลือด ซึ่งก็คือปริมาณไวรัส

ฉันจะทำการทดสอบ PCR สำหรับ HIV ได้เร็วแค่ไหน?

หลายคนยังไม่เชื่อถือผลลัพธ์ที่ได้รับในวันแรกหลังจากสัมผัสกับเชื้อโรค การตรวจ HIV PCR หลังจากเวลาใดถือว่าเหมาะสมที่สุด? ยิ่งเวลาผ่านไปตั้งแต่วินาทีที่ไวรัสเข้าสู่ร่างกาย ยิ่งระบุได้ง่ายขึ้น แต่เราไม่ควรลืมว่าการรักษาผู้ป่วยจะยากขึ้นเรื่อยๆ เมื่อเวลาผ่านไป หากทราบได้อย่างน่าเชื่อถือว่ามีการติดต่อกับผู้ป่วย ไม่ควรรอเกิน 14 วัน หากไม่มีข้อมูลเกี่ยวกับการติดต่อเชิงบวก ผู้ติดเชื้อเอชไอวีจึงควรทำการทดสอบทันทีเมื่อมีอาการแรกเกิดขึ้น

HIV PCR ในสัปดาห์ที่ 9มีความแม่นยำสูง แต่ขณะนี้อาจมีการทดสอบอื่น ELISA ให้เลือก การวิเคราะห์ทางเลือกนี้มีราคาถูกกว่าและแม่นยำด้วย แต่ขึ้นอยู่กับการศึกษาแอนติบอดี ซึ่งน่าเสียดายที่ไม่ปรากฏทันทีหลังการติดเชื้อ ตามหลักการแล้ว เพื่อยืนยันการวินิจฉัย ควรทำการทดสอบทั้งสองแบบ โดยแพทย์จะกำหนดเวลาไว้

PCR เชิงคุณภาพสำหรับเอชไอวีช่วยให้เข้าใจว่าไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องมีอยู่จริงในร่างกายหรือไม่ วิธีการเดียวกันนี้สามารถตรวจจับการติดเชื้ออื่นๆ ได้

การตรวจ HIV ดำเนินการโดยใช้ PCR อย่างไร?

ตรวจหาเชื้อเอชไอวีด้วยวิธี PCRขั้นตอนไม่ซับซ้อนและเริ่มจากการเก็บเลือดดำจากคนไข้ สามารถตรวจสอบได้ทั้ง DNA และ RNA แต่ขั้นตอนในการรับสารจะเหมือนกัน

การวิเคราะห์จะดำเนินการในห้องปฏิบัติการปลอดเชื้อโดยใช้รีเอเจนต์และไพรเมอร์พิเศษ ในหน่วยเวลา จำนวนสำเนาจะเพิ่มขึ้นเป็นค่าที่กำหนด ค่าเหล่านี้ได้รับการประเมินโดยพนักงานห้องปฏิบัติการ เชื้อโรคยังถูกกำหนดให้เป็นไวรัสชนิดเดียวกัน ดังนั้นวิธีนี้ทำให้สามารถศึกษาวัสดุชีวภาพในเชิงคุณภาพและเชิงปริมาณได้

การวินิจฉัยการติดเชื้อ HIV โดยใช้วิธี PCR จำเป็นต้องอยู่ภายใต้เงื่อนไขใดบ้าง

เนื่องจากการวิเคราะห์นั้นไม่ถูก จึงไม่ได้ดำเนินการกับทุกคนและไม่เสมอไป จริงอยู่ที่มีหลายกรณีที่จำเป็นต้องทำ ตัวอย่างเช่น ผู้บริจาคจะต้องทำการทดสอบ HIV PCR การวิเคราะห์จะดำเนินการในกรณีที่เกิดอุบัติเหตุที่ไม่คาดฝันในสถาบันการแพทย์และห้องปฏิบัติการและในกรณีนี้มีความเสี่ยงที่จะสัมผัสกับเลือดของผู้ติดเชื้อจากผู้ที่มีสุขภาพแข็งแรง

ในกรณีส่วนใหญ่ การวิจัยจะดำเนินการตามความสมัครใจ พวกเขาสามารถบังคับเท่านั้น บุคลากรทางการแพทย์และบางครั้งครูและเจ้าหน้าที่การศึกษาอื่นๆ ที่มีการติดต่อกับเด็กเล็ก นอกจากนี้สัญญาณของภูมิคุ้มกันลดลงอย่างรวดเร็วอาจใช้เป็นพื้นฐานสำหรับการตรวจภาคบังคับ

ผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ PCR สำหรับ HIV รวมถึงความแม่นยำและความน่าเชื่อถือ

ความน่าเชื่อถือของการทดสอบ HIV PCRแสดงผลได้สูงมากถึง 99% ควรจำไว้ว่าความแม่นยำนั้นขึ้นอยู่กับกำหนดเวลาด้วย วันที่ห้าหลังจากไวรัสเข้าสู่ร่างกาย ความแม่นยำประมาณ 80% ภายในวันที่ 14 ตัวเลขนี้เพิ่มขึ้นเป็น 98% จากนั้นมันก็ขึ้นไปถึง 99%

การปฏิบัติแสดงให้เห็นว่าในทางปฏิบัติแล้วไม่มีผลลัพธ์ที่เป็นลบลวง บางครั้งผลลัพธ์ที่เป็นบวกลวงก็เกิดขึ้น HIV PCR มีความแม่นยำ 99% การแสดงที่ดีเกี่ยวกับภาวะสุขภาพของผู้ที่เคยสัมผัสกับผู้ติดเชื้อเอชไอวี

การวิเคราะห์เอชไอวี PCRในระยะแรกให้โอกาสในการตอบสนองต่อปัญหาอย่างรวดเร็วและใช้มาตรการที่ทันท่วงทีเพื่อยืดอายุการใช้งาน เป็นความคิดที่ดีที่จะเข้ารับการตรวจหากมีความเสี่ยงต่อการติดเชื้อ

HIV PCR เป็นลบ หมายความว่าอย่างไร?

HIV PCR เป็นลบดังที่ได้กล่าวมาแล้ว ในทางปฏิบัติไม่สามารถเป็นเท็จได้ ในสถานการณ์เช่นนี้แพทย์จะทำการวินิจฉัยว่า "มีสุขภาพดี" และไม่ได้ระบุการตรวจเพิ่มเติมเว้นแต่ว่าอาการทางคลินิกของโรคจะปรากฏขึ้นเมื่อเวลาผ่านไป

จะทำอย่างไรถ้าผลการตรวจ HIV PCR เป็นบวก?

สถานการณ์แตกต่างไปจากเดิมอย่างสิ้นเชิงเมื่อ การทดสอบพีซีอาร์ตรวจพบเชื้อ HIV เป็นบวก ในกรณีนี้คุณสามารถนับข้อผิดพลาดได้ แต่เพื่อยืนยันสมมติฐานนี้จำเป็นต้องทำการตรวจสอบต่อไป ต้องทำการทดสอบซ้ำและการวิจัยเพิ่มเติมโดยใช้วิธีอื่นและแพทย์จะสั่งการทดสอบอย่างแน่นอน ความต้องการของแพทย์ไม่สามารถละเลยได้

PCR สำหรับเอชไอวีดำเนินการในระยะเริ่มแรกและบางครั้งก็มีการกำหนดเมื่อผู้ป่วยได้รับการรักษาด้วยยาต้านไวรัส

แนวโน้มสำหรับการทดสอบ PCR

วิธี PCR ในเวชศาสตร์วินิจฉัยถือได้ว่ามีแนวโน้มดี มีประสิทธิภาพและแม่นยำ จนถึงขณะนี้ข้อเสียเพียงอย่างเดียวถือได้ว่ามีราคาสูง การศึกษาสารพันธุกรรมของอนุภาคไวรัสทำให้สามารถยืนยันหรือหักล้างการปรากฏตัวของการติดเชื้อได้อย่างแม่นยำสูง รวมทั้งทำนายอัตราการพัฒนาของโรคได้ การตรวจ DNA สำหรับ HIV หรือการวิเคราะห์ RNA ให้ความแม่นยำสูงสุดถึง 99% และตั้งแต่ระยะแรกสุด การวินิจฉัยเอชไอวีตั้งแต่เนิ่นๆ ถือเป็นโอกาสที่ดีในการรักษาให้ประสบผลสำเร็จ

ผลลัพธ์จะได้รับการประเมินหลังจาก 14 วันนับจากช่วงเวลาที่คาดว่าจะมีไวรัสเข้ามา สันนิษฐานว่าอาจเป็นการสัมผัสทางเพศที่ไม่มีการป้องกันหรือการฉีดด้วยเข็มที่มีความบริสุทธิ์ที่น่าสงสัย ผลลัพธ์ที่เป็นลบจากการวิเคราะห์ PCR ถือว่าเชื่อถือได้ ในขณะที่ผลลัพธ์ที่เป็นบวกจะต้องได้รับการตรวจสอบเพิ่มเติม

*หากคุณโชคไม่ดีและผลการตรวจ HIV PCR ออกมาเป็นบวก อย่าเพิ่งหมดหวัง ปัจจุบันมีรายการยาต้านไวรัสที่มีประสิทธิภาพทั้งหมดซึ่งสามารถชะลอการลุกลามของโรคและยืดอายุขัยได้ 30-40 ปี

นับตั้งแต่นั้นเป็นต้นมา เทคโนโลยีการทดสอบก็มีวิวัฒนาการที่สำคัญ โดยมีระบบการทดสอบใหม่และปรับปรุงมากมายสำหรับวัตถุประสงค์ด้านการวิจัยและทางคลินิก เนื่องจากการติดเชื้อเอชไอวีไม่สามารถรักษาได้เว้นแต่จะกำหนดสถานะเอชไอวีได้ จึงเป็นเรื่องสำคัญที่จะต้องเข้าใจว่ามีการทดสอบใดบ้างและข้อจำกัดของการทดสอบเหล่านั้น

ขั้นตอนการทดสอบปกติ

“ในปี 1985 จุดประสงค์หลักของการทดสอบคือเพื่อสแกนปริมาณเลือด” สตีฟ โมริน ผู้อำนวยการมหาวิทยาลัยแคลิฟอร์เนีย ซานฟรานซิสโก เล่า

ขณะนั้นยังไม่มีวิธีรักษาการติดเชื้อเอชไอวี นอกจากนี้ ไม่มีใครรู้ว่าผู้ติดเชื้อเอชไอวีจะเป็นโรคเอดส์อยู่เสมอหรือไม่ และอาจใช้เวลานานเท่าใดจึงจะเกิดขึ้น

มาตรการทางการแพทย์เพียงอย่างเดียวคือการรักษาโรคฉวยโอกาสที่ปรากฏเมื่อ ระบบภูมิคุ้มกัน. ดังนั้นผู้คนจึงไม่มีแรงจูงใจที่จะค้นหาสถานะเอชไอวีของตนเอง

ในขณะเดียวกัน หลายคนที่คิดว่าตนมีความเสี่ยงต้องการทราบว่าตนเองติดเชื้อเอชไอวีหรือไม่ ตามคำกล่าวของโมริน สิ่งนี้นำไปสู่

“ความกลัวคือคนที่อยากรู้ว่าตนเองติดเชื้อหรือไม่จะเริ่มบริจาคเลือดเพื่อรับการตรวจ”

เพื่อขจัดความเป็นไปได้นี้ รัฐบาลกลางและรัฐบาลระดับภูมิภาคจึงได้เปิดห้องทดสอบทางเลือกซึ่งผู้คนสามารถค้นหาสถานะเอชไอวีของตนได้ ขอย้ำอีกครั้งว่าเป้าหมายหลักของระบบสาธารณสุขในการทดสอบคือ "การป้องกัน...เพื่อป้องกันไม่ให้ผู้คนแพร่เชื้อไวรัสไปยังบุคคลอื่น"

แต่ด้วยการเกิดขึ้นของการป้องกันเพื่อป้องกันการติดเชื้อฉวยโอกาสและการรักษาด้วยยาต้านไวรัสในเวลาต่อมา เป้าหมายของการทดสอบก็เปลี่ยนไป กลายเป็นเงื่อนไขสำหรับการรักษาและในขณะเดียวกันก็เป็นวิธีการป้องกัน

แม้ว่าเทคโนโลยีจะเปลี่ยนแปลงไปอย่างมากตั้งแต่นั้นมา แต่โดยทั่วไปการทดสอบจะเป็นไปตามขั้นตอนเดียวกับในปี 1985

การติดเชื้อเอชไอวีได้รับการยืนยันโดยการทดสอบสองแบบที่แตกต่างกัน ได้แก่ การทดสอบแบบคัดกรองและการทดสอบเพื่อยืนยัน ในรายงานล่าสุดของมหาวิทยาลัยแคลิฟอร์เนีย ซานฟรานซิสโก นักวิจัยจากมหาวิทยาลัยแมรีแลนด์ นีล คอนสแตนติน อธิบายว่า

“การทดสอบแบบคัดกรองมีความไวสูงมาก ในขณะที่การทดสอบเพื่อยืนยันมีความจำเพาะสูง เนื่องจากความไวสูง อาจมีการตรวจคัดกรอง ผลลัพธ์บวกลวง”.

เนื่องจากการตรวจคัดกรองมีโอกาสที่จะเกิดผลบวกลวง โดยปกติเมื่อได้รับผลบวกเบื้องต้น จะมีการเก็บตัวอย่างเลือดเดียวกันและการตรวจคัดกรองซ้ำเป็นครั้งที่สอง และหากผลเป็นบวกอีกครั้ง จะเป็นการยืนยันประเภทอื่นเท่านั้น ทดสอบแล้ว การทดสอบเพื่อยืนยันจะดำเนินการเฉพาะกับตัวอย่างเลือดที่มีผลการทดสอบเป็นบวกซ้ำๆ เท่านั้น (เป็น "ปฏิกิริยา")

การรวมกันของทั้งสอง ประเภทต่างๆการทดสอบรับประกันว่าผลลัพธ์ที่ได้ "มีความแม่นยำสูง" คอนสแตนตินตั้งข้อสังเกตว่าข้อผิดพลาดทางเทคนิคและหายาก ปัจจัยทางชีววิทยาไม่สามารถยกเว้นได้อย่างสมบูรณ์

การตรวจคัดกรองที่พบบ่อยที่สุดคือการทดสอบเอนไซม์ที่เชื่อมโยงกับอิมมูโนซอร์เบนท์ (ELISA)

โดยทั่วไปแล้ว immunoblotting จะใช้เป็นแบบทดสอบยืนยัน เทคโนโลยีเดียวกันนี้ (การวินิจฉัยโดยใช้ ELISA และ Immunoblotting) ใช้ในการตรวจหาโรคจำนวนมาก เช่น เพื่อวินิจฉัยโรค Lyme ในความเป็นจริง เทคนิคทางภูมิคุ้มกันที่ใช้การทดสอบเหล่านี้เป็นพื้นฐานจน Sally Liska หัวหน้าห้องปฏิบัติการสาธารณสุขเมืองซานฟรานซิสโก เรียกสิ่งเหล่านี้ว่า "ซีรั่มวิทยา 101"

ELISA ถูกใช้เป็นการทดสอบคัดกรองเบื้องต้นด้วยเหตุผลสองประการ ประการแรก มันมีความไวสูงมาก ประการที่สองมันค่อนข้างถูกและใช้งานง่าย ลิสก้ากล่าวเสริมว่า

“การประมวลผลตัวอย่างโดยใช้ ELISA นั้นง่ายกว่ามาก จำเป็นต้องมีเลือดปริมาณเล็กน้อย กระบวนการนี้ใช้แรงงานน้อยกว่า มันเป็นอัตโนมัติมากขึ้น”

ปัจจุบัน ผู้ผลิตหลายรายผลิตระบบทดสอบ HIV ELISA ที่แตกต่างกันมากกว่า 40 ระบบ

มีเพียงไม่กี่รายการเท่านั้นที่ได้รับการอนุมัติให้ใช้ในสหรัฐอเมริกา และการทดสอบบางส่วนได้รับการอนุมัติเพื่อวัตถุประสงค์ในการวิจัยเท่านั้น ระบบทดสอบเหล่านี้ใช้โปรตีนเอชไอวีที่สร้างขึ้นเทียมเพื่อ "จับ" แอนติบอดีจำเพาะที่ร่างกายผลิตขึ้นเพื่อตอบสนองต่อโปรตีนของไวรัส เมื่อจับแอนติบอดีแล้ว คอนสแตนตินอธิบายว่า “สามารถตรวจพบได้โดยรีเอเจนต์ที่ใช้ร่วมกับตัวบ่งชี้ เช่น เอนไซม์ ที่ทำให้เกิดการเปลี่ยนสี” เครื่องจะอ่านการเปลี่ยนแปลงสีซึ่งเป็นตัวกำหนดผลลัพธ์

Immune blotting ทำงานในลักษณะเดียวกัน แต่ใช้ สนามไฟฟ้าซึ่งแยกความแตกต่างระหว่างส่วนประกอบต่างๆ ตามน้ำหนักโมเลกุล ทำให้สามารถตรวจจับแอนติบอดีต่อแอนติเจนของไวรัสจำเพาะได้ ซึ่งจากนั้นจะปรากฎบนกระดาษเป็น "แถบ" ที่สามารถแยกแยะได้ การซับภูมิคุ้มกันตาม Liska:

“ยากขึ้นอีกนิดในการดำเนินการ...และต้องใช้แรงงานมากขึ้น” เธอเสริมว่าการซับภูมิคุ้มกันก็มีความไวน้อยกว่าเช่นกัน ดังนั้นจึง “ไม่ควรใช้เพียงอย่างเดียว”

อิมมูโนล็อตติงเป็นการทดสอบเพื่อยืนยันที่พบบ่อยที่สุด แต่การทดสอบอื่นๆ ได้รับการพัฒนาเพื่อจุดประสงค์นี้ เช่น การทดสอบแอนติบอดีเรืองแสงทางอ้อม หรือการทดสอบภูมิคุ้มกันด้วยรังสี “เมื่อดำเนินการและตีความอย่างถูกต้อง การทดสอบที่เฉพาะเจาะจงมากเหล่านี้จะไม่ให้ผลลัพธ์ที่เป็นบวกลวง” คอนสแตนตินเขียน

“ระยะหน้าต่าง” ทันทีหลังติดเชื้อ

ข้อเสียเปรียบหลักของการทดสอบแอนติบอดีคือ “ช่วงหน้าต่าง” ซึ่งเป็นช่วงเวลาที่ร่างกายใช้ในการผลิตแอนติบอดีเพื่อตอบสนองต่อการติดเชื้อ การทดสอบเอชไอวีแบบมาตรฐานไม่ได้ตรวจพบไวรัสในตัวเอง แต่ตรวจพบแอนติบอดีที่ร่างกายผลิตขึ้น ก่อนที่ร่างกายจะผลิตแอนติบอดี้ บุคคลอาจมีเชื้อเอชไอวีและแพร่เชื้อไวรัสไปยังผู้อื่นโดยไม่ต้องตรวจแอนติบอดีเอชไอวีเป็นลบ

เมื่อการทดสอบ HIV ครั้งแรกได้รับการอนุมัติ ระยะเวลาของกรอบเวลาจะแตกต่างกันไปตั้งแต่ 6 ถึง 12 สัปดาห์ แต่จะนานกว่านั้น เทคโนโลยีที่ทันสมัยให้เราตัดสินใจเพิ่มเติม ระดับต่ำแอนติบอดี ดังนั้นการทดสอบอาจให้ผลลัพธ์ที่เป็นบวกก่อนหน้านี้

“ระบบการทดสอบสมัยใหม่สามารถตรวจพบการติดเชื้อเอชไอวีในคนส่วนใหญ่ได้ภายใน 3-5 สัปดาห์” คอนสแตนตินเขียน “สิ่งนี้เป็นจริงทั้งกับระบบทดสอบ ELISA ทั้งหมดและสำหรับการทดสอบแบบรวดเร็ว การทดสอบบางอย่างมีแนวโน้มที่จะแสดงผลเป็นบวกหลังจากผ่านไป 3 สัปดาห์ แต่โดยรวมแล้วการทดสอบทั้งหมดก็เท่าเทียมกัน” อย่างไรก็ตาม เขาอธิบายว่าสิ่งนี้ “ขึ้นอยู่กับแต่ละบุคคล (ซึ่งอาจไม่สามารถผลิตแอนติบอดีได้เร็วเท่ากับคนอื่นๆ)”

การทดสอบที่ไม่ใช้เลือด

ก่อนหน้านี้ การทดสอบทั้งหมดดำเนินการกับเลือด ล่าสุดได้มีการพัฒนาระบบทดสอบเพื่อตรวจหาแอนติบอดีในน้ำลายและปัสสาวะ การทดสอบช่องปาก OraSure เป็นการทดสอบครั้งแรกที่ได้รับการอนุมัติให้ใช้ในสหรัฐอเมริกา เป็นไปตามระเบียบการคัดกรอง/ยืนยัน เช่นเดียวกับการทดสอบ HIV อื่นๆ นี่ไม่ใช่การทดสอบน้ำลายมากนัก แต่ใช้การขูดของเหลวออกจากเหงือกเล็กน้อย

ข้อดีหลักของการทดสอบดังกล่าวคือ เป็นขั้นตอนที่ไม่รุกราน ซึ่งสะดวกกว่าสำหรับผู้ป่วยจำนวนมาก และการทดสอบดังกล่าวสามารถใช้ในสถานที่ที่ไม่สามารถเจาะเลือดได้ด้วยเหตุผลด้านสุขอนามัยหรือในทางปฏิบัติ การทดสอบปัสสาวะยังได้รับการพัฒนา แต่ไม่ได้รับความสนใจมากเท่ากับการทดสอบน้ำลาย เนื่องจากไม่ได้รับการอนุมัติการตรวจปัสสาวะเพื่อยืนยัน และยังคงต้องให้เลือดเพื่อยืนยันผล

การทดสอบอย่างรวดเร็วสำหรับเอชไอวี

นวัตกรรมอีกอย่างหนึ่งคือการทดสอบเอชไอวีอย่างรวดเร็ว สำหรับการทดสอบแบบทั่วไป ตัวอย่างเลือดจะถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการ และส่งผลให้ผู้ป่วยอาจรอหนึ่งสัปดาห์ก่อนที่จะได้รับผล การทดสอบอย่างรวดเร็วเสร็จสิ้นที่ไซต์งานและสามารถรับผลลัพธ์ได้ภายในครึ่งชั่วโมง เช่นเดียวกับ ELISA ผลลัพธ์ที่เป็นบวกต้องมีการทดสอบอิมมูโนล็อตติงเพื่อยืนยัน

ข้อดีของการทดสอบแบบรวดเร็วคือช่วยขจัดสถานการณ์ที่ผู้ป่วยไม่กลับมารับผล ที่สถานที่ทดสอบเอชไอวีที่ไม่ระบุชื่อ อัตราการไม่กลับมาของผู้ป่วยค่อนข้างต่ำ แต่ในสถานที่เช่นคลินิกโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์ ผู้ป่วยประมาณ 30% ไม่กลับมาเพื่อดูผลการตรวจ

ตามข้อมูลของคอนสแตนติน การทดสอบอย่างรวดเร็ว

“ได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีความแม่นยำเท่ากับ ELISA โดยมีเงื่อนไขว่าจะต้องดำเนินการด้วยความระมัดระวังและโดยบุคลากรที่มีคุณสมบัติเหมาะสม ความเป็นไปได้ที่จะเกิดข้อผิดพลาดทางเทคนิคสำหรับการทดสอบดังกล่าวนั้น ในทางที่ผิด ความเป็นไปได้นั้นสูงกว่า เนื่องจากขั้นตอนดูเหมือนง่ายเกินไป และผู้ใช้อาจเกิดความประมาทในการปฏิบัติ”

เพื่อแก้ไขปัญหานี้ การทดสอบแบบรวดเร็วจำนวนมากในปัจจุบันมีระบบการตรวจสอบในตัวที่ควรพิจารณาว่าได้ปฏิบัติตามขั้นตอนการทดสอบหรือไม่

การกำหนดระยะเฉียบพลันของการติดเชื้อเอชไอวี

ไม่นานหลังจากติดเชื้อ HIV ผู้ป่วยบางรายจะเกิดการติดเชื้อ HIV แบบเฉียบพลัน (หรือ “ระยะแรก”) ซึ่งเป็นช่วงของการเจ็บป่วยโดยมีอาการคล้ายไข้หวัดใหญ่ เช่น มีไข้ ไข้หวัดใหญ่และการติดเชื้ออื่นๆ อาจทำให้เกิดอาการคล้ายกันได้ นักวิทยาศาสตร์หลายคนเชื่อว่าในช่วงเวลานี้บุคคลควรได้รับการรักษาโดยแน่นอนว่าได้รับการวินิจฉัยที่ถูกต้อง ในขณะเดียวกัน การรักษาการติดเชื้อเอชไอวีเฉียบพลันยังคงเป็นประเด็นที่ถกเถียงกัน

ปัจจุบันแนะนำให้ทำการทดสอบ HIV RNA (PCR, HIV test) เพื่อยืนยันการติดเชื้อ HIV เฉียบพลันที่ต้องสงสัย โหลดไวรัส). การทดสอบแอนติบอดีแบบปกติจะไม่สามารถตรวจพบการติดเชื้อเอชไอวีเฉียบพลันได้ เนื่องจากจะเกิดขึ้นในช่วง "ช่วงหน้าต่าง" ซึ่งยังไม่มีการสร้างแอนติบอดี

การทดสอบปริมาณไวรัสสามารถให้ผลบวกลวงได้ อย่างไรก็ตาม การวิเคราะห์ข้อมูลการวิจัยที่ตีพิมพ์ในปี 1999 ในวารสาร American Family Physician เสนอแนะว่าค่อนข้างเป็นไปได้ที่ คำจำกัดความที่แม่นยำระยะเฉียบพลัน : “ในช่วงที่มีการติดเชื้อเอชไอวีแบบเฉียบพลัน ผลตรวจ RNA ของไวรัสแสดงผลมากกว่า 50,000 ชุด/มล. มีกรณีการทดสอบ HIV-1 RNA ที่ให้ผลบวกลวงสามกรณี แต่ในทุกกรณี ผู้ป่วยไม่มีอาการและมีปริมาณไวรัสน้อยกว่า 2,000 ชุดต่อมิลลิลิตร การมีอยู่ของ HIV-1 RNA ในระดับสูง (มากกว่า 50,000 สำเนา/มล.) ในกรณีที่ไม่มีแอนติบอดีต่อ HIV ช่วยให้สามารถวินิจฉัยการติดเชื้อ HIV แบบเฉียบพลันได้”

บน ตอนนี้ไม่มีการอนุมัติการทดสอบอนุภาคไวรัสเพื่อวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีในผู้ป่วย อย่างไรก็ตาม การทดสอบไวรัสได้รับการอนุมัติในสหรัฐอเมริกาเพื่อคัดกรองการบริจาคโลหิตจำนวนมาก หากไม่มีการทดสอบปริมาณไวรัส แนะนำให้ตรวจหาแอนติเจน p24 ซึ่งเป็นโปรตีนของไวรัส เมื่อสงสัยว่าติดเชื้อ HIV แบบเฉียบพลัน ไม่ว่าในกรณีใด เมื่อพ้นช่วงระยะเวลาไปแล้ว การวินิจฉัยควรได้รับการยืนยันโดยการทดสอบแอนติบอดีมาตรฐาน

ELISA ที่มีความแม่นยำลดลง

เพื่อวัตถุประสงค์ทางวิทยาศาสตร์ สามารถใช้ระบบทดสอบ ELISA ซึ่งมีความแม่นยำถูกประเมินต่ำเกินไปโดยเจตนา การทดสอบดังกล่าวถูกนำมาใช้เนื่องจากระดับแอนติบอดีหลังการติดเชื้อเป็นไปตามรูปแบบเฉพาะและคาดเดาได้ 4-6 เดือนหลังจากการแพร่เชื้อ HIV ระดับนี้จะเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็ว และถึงระดับคงที่ ซึ่งเป็นระดับที่ราบสูง ซึ่งยังคงไม่เปลี่ยนแปลงเป็นเวลาหลายปี

ระบบการทดสอบ ELISA สมัยใหม่สามารถตรวจจับระดับแอนติบอดีที่ต่ำมากได้ ELISA ที่มีความแม่นยำลดลงจะไม่ถูกนำมาใช้ในการวินิจฉัยผู้ป่วยอีกต่อไป อย่างไรก็ตาม นักวิทยาศาสตร์และแพทย์สามารถใช้เพื่อทำความเข้าใจว่าไวรัสเพิ่งแพร่ระบาดหรือเป็นการติดเชื้อเก่าหรือไม่ หากการติดเชื้อเกิดขึ้นเมื่อเร็วๆ นี้ การทดสอบที่มีความอ่อนไหวน้อยกว่าซึ่งจะเป็นบวกเมื่อผ่านไป 6 เดือนจะสามารถแสดงสิ่งนี้ได้

Konstantin สรุปบทวิจารณ์ของเขาโดยกล่าวว่ามีความเห็นพ้องต้องกันอย่างสมบูรณ์ระหว่างสถาบันต่างๆ และสถาบันทางระบาดวิทยาเกี่ยวกับการทดสอบ HIV:

“การทดสอบแอนติบอดีมีความไวเกือบ 100% และมีความเฉพาะเจาะจงประมาณ 99%”

ความแม่นยำในการทดสอบระดับนี้แสดงให้เห็นในการศึกษาจำนวนมาก รวมถึงการประเมินความน่าเชื่อถือของชุดทดสอบเชิงพาณิชย์ในตลาดที่ดำเนินการโดยองค์การอนามัยโลกเป็นประจำ

บทคัดย่อนี้เขียนโดย Bruce Mirkinem สำหรับศูนย์ควบคุมและป้องกันโรคแห่งสหรัฐอเมริกา (CDC) เพื่อตอบสนองต่อการเปลี่ยนแปลงแนวทางการทดสอบอย่างเป็นทางการในประเทศนี้ บทความนี้พูดถึงความน่าเชื่อถือของการทดสอบและระบบการทดสอบใหม่ที่เพิ่งเริ่มจดทะเบียนในสหรัฐอเมริกา