Mikrobiologija urogenitalne klamidije. Medicinska mikrobiologija, imunologija in virologija. Rikecioze so velika skupina nalezljivih akutnih febrilnih nalezljivih bolezni, ki jih povzročajo rikecije in imajo skupno patogenezo in klinične simptome.

Klamidije so majhne gramnegativne kokoidne bakterije, velike 250-1500 nm (0,25-1 mikronov). Imajo vse osnovne značilnosti bakterij: vsebujejo dve vrsti nukleinskih kislin (DNK in RNK), ribosome, muramsko kislino (sestavni del celične stene gramnegativnih bakterij), razmnožujejo se z binarno cepitvijo in so občutljive na nekatere antibiotike. .

Leta 1966 je bila na 9. mednarodnem kongresu mikrobiologov klamidija izključena iz razreda virusov.

Taksonomija

Vse klamidije so razvrščene po vrstnem redu Chlamydiaceae, rod Klamidija, slednji vključuje štiri vrste:

  1. Chlamydia trachomatis (Chlamydia trachomatis).
  2. Chlamydia psittaci.
  3. Chlamydia pljučnica.
  4. Chlamydia pecorum.
  • Chlamydia psittaci– povzroča atipično pljučnico, encefalomiokarditis, artritis, pielonefritis pri ljudeh.
  • Chlamydia pecorum nedavno opisan, izoliran od ovc, velik govedo. Podoben Chlamydia psittaci. Vloga v patogenezi človeških bolezni ni znana.
  • Chlamydia pneumoniae povzroča akutne okužbe dihal in blago pljučnico pri odraslih.
  • Pogled Chlamydia trachomatis Najdemo ga samo pri ljudeh; identificiranih je 18 antigenskih variant (serotipov).
    Serotipi A, B, C so povzročitelji trahoma. Prenašalci so žuželke, glavna pot okužbe je vnos povzročitelja z drgnjenjem v predel očesne sluznice. Brazgotine, ki nastanejo kot posledica razvoja infekcijskega procesa, vodijo do izgube vida. Serotipi L1-L3 se razmnožujejo v limfnem tkivu in so povzročitelji tropske spolne bolezni Lymphogranuloma venerum. Pri serotipih D do K pride do okužbe s spolnim stikom, precej redkeje z drgnjenjem, novorojenček med porodom pa se okuži od okužene matere.

Fiziologija in patogeneza

Življenjski cikel klamidije je bistveno drugačen od bakterijskega.

Klamidija obstaja v dveh oblikah, ki se razlikujeta po morfoloških in bioloških lastnostih. Zelo nalezljiva zunajcelična oblika, podobna sporam, je osnovno telo (EB), vegetativna, razmnoževalna intracelularna oblika pa je retikularno telo (RT).

ET ima obliko krogle s premerom 0,15-0,2 mikrona. RT ima strukturo tipičnih gram-negativnih bakterij z velikostjo približno 1 mikrona (glej sliko 1.). ET vsebujejo več disulfidnih vezi, kar jim omogoča, da se uprejo osmotskemu tlaku.

Prva stopnja infekcijskega procesa je adsorpcija ET na plazmalemi občutljive gostiteljske celice. Pomembna vloga V tej fazi igrajo vlogo elektrostatične sile. Vnos klamidije poteka skozi endocitozo. Invaginacija dela plazmaleme z adsorbiranim ET pride v citoplazmo s tvorbo fagocitne vakuole. Ta faza traja 7-10 ur. Po tem se že v celici v 6-8 urah ET reorganizira v vegetativno obliko - retikularno telo, ki je sposobno rasti in delitve. V tej fazi je potek antibakterijskih zdravil učinkovit, saj ET ni občutljiv nanje.

Proliferacija klamidije povzroči nastanek vključkov, znanih kot Provacekova telesca. V 18-24 urah razvoja se lokalizirajo v citoplazmatskem veziklu, ki nastane iz membrane gostiteljske celice. Vključek lahko vsebuje od 100 do 500 klamidij. Ustavitev procesa na tej stopnji vodi do vztrajnosti klamidijska okužba. Nato se začne proces zorenja retikularnih teles preko prehodnih (vmesnih) teles v 36-42 urah razvoja v naslednjo generacijo ET. Celoten razmnoževalni cikel klamidije traja 48-72 ur in se konča z uničenjem prizadete celice, če nastanejo za klamidijo neugodne presnovne razmere, se ta proces lahko zamakne za daljše obdobje.

Klamidija se lahko sprosti iz okužene celice skozi ozek rob citoplazme. V tem primeru lahko celica ostane sposobna preživeti, kar lahko pojasni asimptomatski potek klamidijske okužbe.

Obrambna reakcija na začetni fazi okužbo izvajajo polimorfonuklearni limfociti. Poliklonska aktivacija limfocitov B ima pomembno vlogo pri zaščiti telesa. V krvnem serumu in sekretornih tekočinah s klamidijo se odkrijejo znatne količine imunoglobulinov IgG, IgM, IgA. Vodilno vlogo pri zaščiti pred klamidijsko okužbo pa imajo celice T-pomočnice, ki aktivirajo fagocitno aktivnost makrofagov.

Ultrastruktura

Z uporabo ultrastrukturnih analiznih metod je bilo mogoče dokazati možnost obstoja klamidije v epitelijskih celicah in fibroblastih okužene sluznice. Klamidijo absorbirajo periferni monociti in se razširijo po telesu, monociti se naselijo v tkivih in spremenijo v tkivne makrofage (v sklepih, v žilah, v predelu srca). Tkivni makrofagi lahko ostanejo sposobni preživetja več mesecev, hkrati pa so močan antigenski stimulator, kar povzroči nastanek fibroznih granulomov v zdravem tkivu. Klamidija ali njeni delci se lahko sprostijo iz celic in povzročijo nastanek specifičnih protiteles, ne glede na to, ali je na mestu okužbe odkrit klamidijski antigen.

Struktura celične stene klamidije ustreza splošno načelo gradnja gram-negativnih bakterij (slika 2). Sestavljena je iz notranje citoplazemske in zunanje membrane (obe sta dvojni in zagotavljata trdnost celične stene). Antigenske lastnosti klamidije določa notranja membrana, ki jo predstavljajo lipopolisaharidi. Vanjo so integrirani tako imenovani proteini zunanje membrane (OMP). Major Outer Membrane Protein (MOMP) predstavlja 60 % skupno število veverica. Preostalo antigensko strukturo predstavlja druga vrsta proteinov zunanje membrane - OMP-2.

Antigeni

Vse klamidije imajo skupen skupinski, rodovno specifičen antigen (lipopolisaharidni kompleks, katerega reaktivna polovica je 2-keto-3-deoksioktanojska kislina), ki se uporablja pri diagnosticiranju bolezni z imunofluorescenčnimi metodami s specifičnimi protitelesi.

Proteini MOMP in OMP-2 vsebujejo epitope, specifične za vrsto in serotip. Vsebujejo pa tudi področja velike podobnosti med vrstami (rodovno specifični epitopi), kar omogoča navzkrižne reakcije. Glavni protein celične membrane in drugi proteini, bogati s cisteinom, so povezani z disulfidnimi vezmi. Odkritih je bilo pet disulfidno vezanih genov za izomerazo, ki lahko igrajo vlogo pri prestrukturiranju beljakovin, bogatih s cisteinom, med diferenciacijo elementarnih telesc v retikularna. U Сhl. trachomatis Identificiranih je bilo 9 genov, ki kodirajo proteine ​​površinske membrane Klamidija strpljučnica–18.

Tabela 1. Antigeni klamidije (po Mardh P., 1990)

Genetika

Leta 1998 so Stephens et. al. poročali o sekvenciranju genoma Chlamydia trachomatis. Genom klamidije je majhen in ne predstavlja več kot 15 % genoma E. coli. Sestavljen je iz kromosoma, ki vsebuje 1.042.519 baznih parov (58,7 %), in plazmida, ki vsebuje 7.493 baznih parov.

Analiza genoma je omogočila identifikacijo 894 genov, ki kodirajo različne proteine. Podobnost s predhodno raziskanimi beljakovinami drugih bakterij je omogočila določitev funkcionalni namen 604 (68 %) kodiranih proteinov. 35 (4 %) beljakovin je bilo podobnih beljakovinam v drugih bakterijah. Preostalih 255 (28 %) proteinov je imelo sekvence, ki so bile drugačne od tistih, ki so bile predhodno raziskane. Analiza zaporedja beljakovin je pokazala, da se 256 (29 %) klamidijskih proteinov združuje v 58 družin znotraj genoma, podobno kot združevanje beljakovin v bakterije z majhnimi genomi, kot sta Mycoplasma in Haemophilus influenzae.

1) osnovna telesa - majhne (0,2 - 0,5 μm) elektronsko gosto sferične strukture s kompaktnim nukleoidom in togo troslojno celično steno;

2) začetna (začetna) ali retikularna telesa - velike (0,8 - 1,5 μm v premeru) sferične formacije z mrežasto strukturo s tanko celično steno in fibrilarnim nukleoidom;

3) vmesna telesa - vmesna stopnja med osnovnimi in retikularnimi telesi.

Elementarna telesca so kužna, retikularna telesca pa so vegetativna oblika klamidije. Vegetativne oblike se razmnožujejo z binarno cepitvijo intracelularno, vendar niso nalezljive, ko se sprostijo iz gostiteljske celice. Življenjski cikel klamidije se začne z dejstvom, da gostiteljska celica fagocitira osnovna telesca, nato pa se v nekaj urah reorganizirajo, povečajo in spremenijo v retikularne oblike, ki se razmnožujejo s prečno delitvijo. Nastale hčerinske oblike se prav tako razmnožujejo z binarno cepitvijo. Življenjski cikel se konča, ko se nastajajoče vmesne oblike reorganizirajo (zgoščijo), zmanjšajo in spremenijo v osnovna telesa. Razmnoževanje znotraj citoplazemskih veziklov klamidija tvori mikrokolonije, obdane z membrano, ki izhaja iz invaginacije celične membrane med fagocitozo osnovnega telesa. Vse 3 stopnje razvoja klamidije najdemo v mikrokolonijah. V eni celici lahko nastane več mikrokolonij v primeru fagocitoze več elementarnih teles. Po pretrganju stene vezikla in membrane gostiteljske celice se novonastale klamidije sprostijo in osnovna telesca, ki okužijo druge celice, ponovijo razvojni cikel. Za mikroskopsko odkrivanje klamidije v okuženih celicah (tkivih) različne načine barvanje: Romanovsky - Giemsa, Castenada, Macchiavello itd. Pri barvanju po Romanovsky - Giemsa pridobijo modro oz. vijolična. Pri mikroskopiranju mokrih preparatov pod steklom s faznokontrastnim optičnim sistemom pa so klamidije dobro vidne tudi v neobarvanem stanju. IN optimalni pogoji Pri rasti v evkariontskih celicah je življenjski cikel klamidije 17–40 ur. Klamidija se dobro razmnožuje v rumenjakovi vrečki piščančjih zarodkov pri temperaturah od 33 do 41 °C (odvisno od vrste), pa tudi v celičnih kulturah različnih vretenčarjev. . Vsebnost G + C v DNA klamidije se giblje od 39 do 45 mol%, razmerje RNA / DNA v elementarnih telescih je 2-krat manjše kot v retikularnih telescih. U C. trachomatis odkriti sta bili dve pomembni presnovni lastnosti: sposobnost sintetiziranja glikogena in prekurzorjev folna kislina, po čemer jih (ob upoštevanju drugih lastnosti) zlahka ločimo od drugih vrst - C. psittaci in C. pneumoniae(Tabela 51).


Tabela 51

Razlikovalne značilnosti treh tipov Klamidija

Tabela 1.

Klamidijski serovarji

bolezni

Trahom

Lymphogranuloma venerum (LGV)

A, B, B a, C

Trahom in paratrahom

Chlamydia trachomatis

Od D do K

L, L 2, L 2 a, L 3

Urogenitalna klamidija in pljučnica novorojenčkov

Lymphogranuloma venereum

Chlamydia psittaci

8 (1 U) serovarjev

Ornitoza (psittakoza)

Chlamydia pneumoniae

TWAR, AR, RF, CWL

Pljučnica, akutne okužbe dihal, ateroskleroza, sarkoidoza, bronhialna astma

Klamidija (družina Chlamydiaceae)

Taksonomski položaj. Klamidija spada v red Chlamydiales, družina Chlamydaceae, družina Klamidija. Obstajajo tri vrste klamidije - Z.trachomatis, Z.psittaci, Z.pneumoniae, – povzročajo bolezni pri ljudeh, živalih in več vrstah, ki so patogene samo za živali (npr. , S. resogit, S.abortus, C. felis in itd.). Razvrstitev klamidije, patogene za ljudi, je predstavljena v tabeli. 1

Po zadnji klasifikaciji družina Chlamydaceae predlagano, da se razdeli na dva rodova: rod Chlamydia, ki ga predstavlja vrsta Z.trachomatis, in spol Chlamidophila, ki vključuje vrste Z.psittaci in Z.pneumoniae.

Glavne faze življenjskega cikla klamidije:

1) elementarna telesa – majhne (0,2–0,5 μm) elektronsko gosto sferične strukture s kompaktnim nukleoidom in togo troslojno celično steno;

2) začetna (izvirna) ali retikularna telesca– velike (0,8-1,5 µm v premeru) sferične tvorbe z mrežasto strukturo s tanko celično steno in fibrilarnim nukleoidom;

3) vmesna telesa– vmesna stopnja med osnovnimi in retikularnimi telesi.

Elementarna telesa so nalezljive, retikularne pa so vegetativna oblika klamidije. Vegetativne oblike se razmnožujejo z binarno cepitvijo intracelularno, vendar niso nalezljive, ko se sprostijo iz gostiteljske celice. Življenjski cikel klamidije se začne z dejstvom, da gostiteljska celica fagocitira osnovna telesca, nato pa se v nekaj urah reorganizirajo, povečajo in spremenijo v retikularne oblike, ki se razmnožujejo s prečno delitvijo. Nastale hčerinske oblike se prav tako razmnožujejo z binarno cepitvijo. Življenjski cikel se konča, ko se nastajajoče vmesne oblike reorganizirajo (zgoščijo), zmanjšajo in spremenijo v osnovna telesa. Razmnoževanje znotraj citoplazemskih veziklov klamidija tvori mikrokolonije, obdane z membrano, ki izhaja iz invaginacije celične membrane med fagocitozo osnovnega telesa. Vse 3 stopnje razvoja klamidije najdemo v mikrokolonijah. V eni celici lahko nastane več mikrokolonij v primeru fagocitoze več elementarnih teles. Po pretrganju stene vezikla in membrane gostiteljske celice se novonastale klamidije sprostijo in osnovna telesca, ki okužijo druge celice, ponovijo razvojni cikel. Za mikroskopsko odkrivanje klamidije v okuženih celicah (tkivih) se uporabljajo različne metode barvanja: Romanovsky-Giemsa, Castenada, Macchiavello itd. Pri barvanju po Romanovsky-Giemsi pridobijo modro ali vijolično barvo. Pri mikroskopiranju mokrih preparatov pod steklom s faznokontrastnim optičnim sistemom pa so klamidije dobro vidne tudi v neobarvanem stanju. V optimalnih pogojih rasti v evkariontskih celicah je življenjski cikel klamidije 17-40 ur. Klamidija se dobro razmnožuje v rumenjakovi vrečki piščančjih zarodkov pri temperaturah od 33 do 41 ° C (odvisno od vrste), pa tudi v celičnih kulturah. različnih vretenčarjev. Vsebnost G + C v DNA klamidije se giblje od 39 do 45 mol%, razmerje RNA / DNA v osnovnih telescih je 2-krat manjše kot v retikularnih telescih. C. trachomatis ima dve pomembni presnovni lastnosti: sposobnost sinteze prekurzorjev glikogena in folne kisline, po kateri se (ob upoštevanju drugih lastnosti) zlahka razlikuje od drugih vrst - C. psittaci in C. pneumoniae (tabela 2).

Razlikovalne značilnosti treh tipov Klamidija

tabela 2

Chlamydia trachomatis

Chlamydia psittaci

Chlamydia pneumoniae

1. Oblika elementarnih teles je sferična

2. Znotrajcelične kolonije so običajno kompaktne. Klamidije sintetizirajo glikogen, ki ga zaznamo z jodnim testom

3. Klamidije sintetizirajo esencialne prekurzorje folne kisline, zato njihovo razmnoževanje v piščančjih zarodkih zavira sulfadiazin (1 mg/zarodek)

4. Stopnja hibridizacije DNA s sevi C. psittaci in C. pneumoniae ni večja od 10 %

1. Oblika elementarnih teles je sferična

2. Mikrokolonije znotraj celic so manj kompaktne, klamidije pa se pogosto nahajajo po vsej citoplazmi, ne tvorijo glikogena

3. Klamidije ne sintetizirajo prekurzorjev folne kisline, zato njihove rasti v rumenjakovi vrečki piščančjih zarodkov sulfadiazin (1 mg/zarodek) ne zavira.

4. Stopnja hibridizacije DNA s sevi C. trachomatis in C. pneumoniae ni večja od 10 %

1. Oblika elementarnih teles je hruškasta

2. Znotrajcelične kolonije so podobne mikrokolonijam C. psittaci; klamidija ne sintetizira glikogena

3. Klamidija ne sintetizira prekurzorjev folne kisline, zato ni občutljiva na sulfadiazin. Piščančji zarodki ne rastejo dobro

4. Stopnja hibridizacije DNA s sevi C. trachomatis in C. psittaci ni večja od 10 %

Morfološke in tinktorialne lastnosti. Klamidije so majhne gramnegativne bakterije sferične ali jajčaste oblike. Ne tvorijo spor in nimajo bičkov ali kapsul.

Struktura celične stene klamidije se razlikuje od drugih bakterij: je dvoslojna membrana, ki razmejuje periplazemski prostor in ne vsebuje (ali vsebuje v majhnih količinah) N-acetilmuramske kisline, glavne sestavine peptidoglikana. Togost celični steni dajejo peptidi, zamreženi s peptidnimi mostovi. V drugih pogledih je klamidija podobna drugim gram-negativnim bakterijam. Imajo glikolipide, podobne LPS zunanje membrane celične stene gramnegativnih bakterij, pri barvanju po Gramu pa dobijo rdečo barvo. Glavna metoda za identifikacijo klamidije je metoda obarvanja po Romanovsky-Giemsa.

Klamidije so polimorfne, kar je posledica značilnosti njihovega razmnoževanja. Za edinstven razvojni cikel klamidije je značilno menjavanje dveh različne oblike obstoj – osnovno in retikularno (ali začetnih) teles.

Elementarna telesa so majhni (velikosti 0,2-0,3 mikronov) presnovno neaktivni kužni delci, ki se nahajajo zunaj celice. Imajo debelo lupino, sestavljeno iz notranje in zunanje membrane, kar določa njihovo relativno visoko odpornost na neugodne okoljske razmere. Osnovna telesa so obarvana rdeče po Romanovsky-Giemsi. Znotraj celic se osnovna spremenijo v retikularna telesa.

Retikularna telesa so vegetativna oblika klamidije, običajno imajo jajčasto obliko in so večkrat večja od osnovnih teles (njihova velikost je 0,4+0,6x0,8-5-1,2 mikronov). Nahajajo se v celici blizu jedra in so po Romanovsky-Giemsi obarvani modro ali vijolično. Infektivnost retikularnih teles je izjemno nizka v primerjavi z osnovnimi.

Znotraj celic se osnovna telesca spremenijo v retikularna telesca, ta pa se večkrat razdelijo z binarno cepitvijo, nato se zgostijo in spremenijo v elementarna telesca. Na koncu cikla slednji zavzamejo večino gostiteljske celice. Z raztezanjem stene vakuole jo raztrgajo, nato pa še plazemsko membrano celice. Razvojni cikel klamidije traja 24–48 ur in se konča s smrtjo gostiteljske celice in sproščanjem elementarnih telesc. Slednji, ko se sprostijo, okužijo sosednje intaktne celice in cikel se ponovi.

Klamidija se goji v rumenjakovi vrečki razvijajočih se piščančjih zarodkov, v telesu občutljivih živali in v kulturi celic, kot so HeLa, McCoy, Hep-2. Optimalna temperatura za gojenje je +35 ° C. Pred okužbo celične kulture obsevamo ali tretiramo s cikloheksamidom, ki klamidijam omogoči lažjo absorpcijo ATP. Za C. trachomatis, povzročitelja lymphogranuloma venereum, je značilna večja virulentnost, zato ga je lažje gojiti v vseh predlaganih živih modelih, ne da bi bila potrebna predhodna priprava celičnih kultur.

Aktivnost encimov. Klamidija ima majhen nabor encimov. Lahko fermentirajo piruvično kislino, sintetizirajo nekatere lipide itd. Klamidije pa ne morejo sintetizirati visokoenergijskih spojin in zunaj gostiteljskih celic so njihove presnovne funkcije zmanjšane na minimum. Zagotavljanje klamidije s presnovki se izvaja predvsem zaradi vitalne aktivnosti gostiteljskih celic. Poleg tega so lahko nekateri metaboliti (na primer izolevcin) zaviralci rasti klamidije in verjetno zato zagotavljajo latentni potek klamidije.

Antigenska struktura.

Klamidija ima tri vrste antigenov:

♦ rodovno specifični termostabilni lipopolisaharid (glikolipid), ki se nahaja v celični steni klamidije. Zazna se z uporabo RSC;

♦ vrstno specifičen antigen beljakovinske narave, ki se nahaja bolj površinsko - v zunanji membrani. Zaznano z uporabo RIF;

♦ variantno specifični antigen beljakovinske narave.

Poleg tega imata C. trachomatis in C. psittaci za tip specifične antigene, ki so verjetno membranski peptidi. Razvrstitev klamidije v serološke različice, ki temelji na njihovi antigenski strukturi, je predstavljena v tabeli. 2

Dejavniki patogenosti. Beljakovine zunanje membrane klamidije so povezane z njihovimi adhezivnimi lastnostmi. Ti adhezini se nahajajo le v osnovnih telesih. Poleg tega klamidija proizvaja endotoksin (LPS). Morda nekateri od njih izločajo eksotoksin, ki ima smrtonosen učinek: ob intravenoznem dajanju povzroči smrt miši. Očitno so beljakovine zunanje membrane antifagocitni dejavnik, saj lahko zavirajo fuzijo fagosoma z lizosomom.

Poleg tega imajo nekatere klamidije tako imenovani protein toplotnega šoka (HSP), ki lahko povzroči avtoimunske reakcije.

Odpornost. Odpornost klamidije na različne okoljske dejavnike je precej visoka. So odporne na nizke temperature(ne izgubijo aktivnosti tudi pri zamrzovanju pri - 50... - 70 ° C), sušenje. Na primer, povzročitelj psitakoze lahko vztraja v zunanjem okolju (na primer v leglu ptičjega gnezda) do nekaj mesecev. Kot vse bakterije, ki ne tvorijo spor, pa je tudi klamidija precej občutljiva na toploto in jo različna razkužila hitro inaktivirajo.

Epidemiologija, patogeneza, klinika. Bolezni, ki jih povzroča klamidija, imenujemo klamidija. Obstajajo antroponozna in zooantroponozna klamidija. Bolezni, ki jih povzroča Z.trachomatis in Z.pneumoniae, – antroponoza. Ornitoza, katere povzročitelj je Z.psittaci, je zooantroponozna okužba. Psitakoza se ne prenaša s človeka na človeka. S. resogit, S.abortus, C. felis in druge vrste klamidije prizadenejo samo živali.

Klamidija je epiteliotropna in zato lahko okuži epitelij različnih organov. Množično razmnoževanje klamidije v epitelijskih celicah povzroči uničenje epitelne plasti in nastanek razjed, ki se celijo z nastankom brazgotin in adhezij. Brazgotinske spremembe na roženici s trahomom vodijo v slepoto, vnetje medeničnih organov z urogenitalno klamidijo vodi v neplodnost.

Po smrti velikega števila epitelijskih celic lahko povzročitelj vstopi v kri, parenhimske organe in se fiksira v limfoidnem tkivu. To je še posebej značilno za venerično limfogranulomatozo in ornitozo. Poleg tega so številne vrste klamidije sposobne latentnega obstoja ali vztrajnosti v telesu gostitelja, kar povzroča imunske in alergijske spremembe v telesu, na primer pri Reiterjevem sindromu.

Glede na njihove značilnosti zavzemajo klamidije neodvisen (poseben) položaj med drugimi mikroorganizmi - prokarioti. Za človeka so pomembni predvsem predstavniki dveh rodov - Chlamydia in Chlamydophila. Najpomembnejše so tri vrste.

Klamidija trachomatis , katerih različni serotipi povzročajo trahom, venerični limfogranulom in najpogostejši urogenitalna klamidija.

Chlamydophila psittaci vzroki psitakoza in zoonotska klamidija.

Chlamydophila pneumoniae povzroča antroponotično pljučnico, akutne okužbe dihal, razvoj nekaterih oblik je povezan s tem patogenom bronhialna astma, ateroskleroza.

Morfološke značilnosti.

Celični cikel razvoja klamidije ima dve glavni obliki - elementarna telesa (ET) je nalezljiva oblika in retikularna telesa (RT) - vegetativna oblika. Sferični ET so precejšnji manjše velikosti(manj kot 300 nm v premeru), imajo bolj togo strukturo z elektronsko gostoto, so presnovno malo aktivni in prilagojeni na kratkotrajni zunajcelični obstoj.

Razvojni cikel klamidije se izvaja v citoplazemski vključitvi - fagosom(vakuola), kamor vstopijo ET s stimulacijo endocitoze. Toplotno labilni efektorski proteinski površinski antigeni klamidije so vključeni v proces adsorpcije in endocitoze. ET zavirajo fagosomsko-lizosomsko fuzijo in se s sodelovanjem glavnega površinskega proteina pretvorijo v RT, ki imajo aktivno presnovo, večje velikosti in aktivno binarno fisijo. Cikel razmnoževanja se konča z obratnim prehodom RT v ET, pretrganjem inkluzijskih membran in omejevalnih membran gostiteljske celice, sprostitvijo ET iz celic, nato ET okuži nove celice. Inkluzijski organi odkriti v celicah s svetlobno in imunoluminescenčno mikroskopijo.

Poleg tega so klamidije sposobne tvoriti L-oblike, obstojne oblike.

Kulturne lastnosti.

Klamidije ne rastejo na hranilnih gojiščih najkompleksnejše sestave (zaradi tega so po lastnostih podobne rikeciji, zlasti pa se lahko za njihovo gojenje uporabljajo laboratorijske živali in piščančji zarodki (biotest) in posebej občutljive živalske celične linije - najpogosteje McCoy). celic (pogosteje z zdravljenjem s citostatiki za povečanje občutljivosti), ki so veljale za »zlati standard« za diagnostiko.

Biokemijske lastnosti.

Antigenska struktura.

1. Označite površinski rod-specifični antigen(LPS), lokaliziran na zunanji membrani celične stene. LPS ima dve antigenski determinanti, ena je specifična za celoten rod, druga navzkrižno reagira z nekaterimi drugimi gramnegativnimi bakterijami (Salmonella serovar minnesota) in je termostabilna.

2. MOMR - glavni protein zunanje membrane deluje kot strukturni protein in Porina. Vključuje termolabilne proteinske determinante, ki imajo specifičnost vrste, tipa in serovarja.

Determinanti patogenosti.

1. Endotoksin (lipopolisaharid), podoben endotoksinom gram-negativnih bakterij.

2. Eksotoksini so toplotno labilne snovi.

3. Antigeni celične površine, ki zavirajo obrambne reakcije.

Faktorji patogenosti klamidije preprečujejo fagosomsko-lizosomsko fuzijo v fagocitih.

Kratek opis distribucije.

Urogenitalna klamidija- najpogostejše oblike klamidije. IN velike države(ZDA, Rusija) letno zabeležijo več milijonov primerov, v svetu - od 50 do 90 milijonov primerov. Redkost začetnih manifestacij in hude posledice urogenitalne klamidije, zlasti pri ženskah (reproduktivne motnje, infekcijski zapleti), postavljajo posebne zahteve za pravočasno laboratorijsko diagnozo. Klamidijski serovarji D - K Klamidija trachomatis, ki povzročajo urogenitalno klamidijo, se prenašajo s človeka na človeka s spolnim stikom. Asimptomatsko prenašalstvo opazimo pri vsaj 5 % moških in 10 % žensk. Nekateri serotipi tega patogena povzročajo tako pogoste bolezni v preteklosti, kot so trahom(spremljajo ga lezije veznice in sosednjih očesnih tkiv, ki pogosto vodijo do sive mrene in slepote) in venerični limfogranulom (registrirano predvsem v nerazvitih državah Azije, Afrike in Latinske Amerike s toplim podnebjem).

Psitakoza- klamidijska okužba, ki jo povzroča C.psittaci. Oseba se okuži od ptic - glavnih gostiteljev tega patogena - s prahom v zraku in kapljicami v zraku. V mestnih razmerah so glavna nevarnost golobi (od 20% do 100% je okuženih s tem povzročiteljem; otroci pogosto pridejo v stik z njimi. Doma so vir lahko kanarčki in predvsem papige (povzročajo najhujšo obliko - psitakozo). Psitakoza se pogosto pojavi kot huda intersticijska pljučnica. Poleg tega povzročajo serotipi tega patogena. zoonotska klamidija(npr. ti virusni splav ovc, klamidija pri govedu itd.), se lahko ob stiku z bolnimi živalmi pri ljudeh razvijejo različne oblike klamidije. Klinične in epidemiološke značilnosti zoonotske klamidije pri ljudeh niso dovolj raziskane.

Bronhopnevmonija, ki jo povzroča C.pneumoniae. To so antroponozne okužbe, ki se prenašajo s človeka na človeka, večina primerov je subkliničnih. Lezije zgornjih dihalnih poti se pojavijo z naknadnim razvojem bronhopnevmonije. Gre za pogoste okužbe (protitelesa proti C.pneumoniae najdemo pri skoraj polovici odrasle populacije), vendar še vedno slabo diagnosticirane. S tem patogenom je povezan razvoj nekaterih oblik bronhialne astme in ateroskleroze.

Ob upoštevanju raznolikosti kliničnih manifestacij in potrebe po razlikovanju med različnimi klinične oblike Posebno pomembna je laboratorijska diagnostika klamidije (predvsem genitalne in ekstragenitalne).

Avtor: morfološke značilnosti se ne razlikuje od klamidijske psitacije. Prav tako tvorijo majhna elementarna telesa, ki se s kasnejšo delitvijo spremenijo v retikularna telesa. Celična stena teh klamidij je okvarjena: v peptidoglikanu ni peptidnih mostov. C. trachomatis ima kompleksno antigensko strukturo. Delijo se na seroskupine in serovare glede na proteine ​​zunanje membrane: A, B, Ba, D-K, 1-3. Identificiranih je bilo več biovarjev na podlagi njihovih različnih sposobnosti pritrjevanja različne celice, zlasti kolumnarnega epitelija sečnice in veznice očesa. Serogene skupine 1-3 so povzročitelji venerične limfogranulomatoze. Pri urogenitalni klamidiji izoliramo serološke skupine D-K. Faktorji patogenosti urogenitalne klamidije vključujejo beljakovine zunanje membrane, ki imajo esterazno aktivnost, ki spodbuja adhezijo. Po uničenju klamidije se sprosti endotoksin (LPS), ki povzroči toksinemijo. Urogenitalna klamidija spodbuja nastajanje gama interferona, hkrati pa zmanjšuje raven alfa interferona. V telesu lahko vztrajajo dolgo časa. V krvnem serumu bolnikov odkrijemo protitelesa proti zunanji membrani celične stene. Poleg tega navzkrižno reagirajoča protitelesa nastajajo z različnimi organi človeškega telesa.

Trahom

Trahom je kronična nalezljiva očesna bolezen, za katero je značilno vnetje veznice in roženice s tvorbo specifičnih foliklov in njihovim kasnejšim brazgotinjenjem. Chlamydia trachoma ima 15 serovarjev, 4 od njih povzročajo trahom, 8 povzroča inkluzijski konjunktivitis (ali blenorejo inkluzijskih telesc), ostali povzročajo vnetje genitourinarni organi in lymphogranulomatosis venereum Okužba s trahomom se pojavi od bolne osebe preko kontaminiranih rok, brisač, šalov, posode itd. sluznica genitourinarnih organov. Za laboratorijska diagnostika trahoma, po anesteziji očesa z vatirano palčko odstranimo sluz in gnoj, epitelij veznice pa postrgamo s topim koncem skalpela. Osnovno standardne metode diagnostika je naslednja: mikroskopska (odkrivanje Provacek-Halberstadterjevih telesc v prizadetih celicah), fluorescentna (odkrivanje antigenov klamidije z RIF), bakteriološka (izolacija povzročitelja z okužbo piščančjih zarodkov ali celičnih kultur), serološka (določanje specifičnih protiteles). v krvnem serumu). IN Zadnje čase Testni sistemi so bili ustvarjeni in se uspešno uporabljajo za izvajanje verižne reakcije s polimerazo za identifikacijo patogena.

Bakterioskopski pregled

Ostružki (ne brisi!) iz veznice se nanesejo na stekelca, fiksirajo z redkimi fiksativi, obarvajo po Romanovsky-Giemsi 3-4 ure in mikroskopirajo. V epitelijskih celicah so vidni vključki v obliki kokijev velikosti do 10 mikronov. Nativne preparate lahko pregledamo tudi pod faznokontrastnim ali anoptralnim mikroskopom. Še bolje je uporabiti metodo neposredne ali posredne imunofluorescence. Da bi to naredili, se brisi strganja fiksirajo v hladnem acetonu 15 minut, obdelajo s fluorescenčnimi protitelesi in pregledajo pod fluorescenčnim mikroskopom. V prisotnosti trahoma klamidije so v citoplazmi celic vidni otoki specifičnega sijaja.

Bakteriološke raziskave

Gojenje povzročitelja trahoma je zlati standard za laboratorijsko diagnostiko bolezni v večini držav sveta. Za izolacijo klamidije se s testnim materialom okužijo piščančji zarodki ali celične kulture L-929, McCoy, Hela. Pri okužbi celičnih kultur se uporablja metoda "prisilne adsorpcije" s centrifugiranjem materiala v epruvetah z enoslojnimi celičnimi kulturami. Okuženi zarodki ali celične kulture so predhodno obdelane inkubiramo 5-6 dni pri 35-36 ° C. Razvoj klamidije odkrijemo s fazno-kontrastno mikroskopijo ali imunofluorescenco, testiramo na glikogen in ugotovimo diferenciacijo v RSC. različne vrste Klamidija se izvaja s posebnimi bakteriološkimi metodami za diagnosticiranje trahoma, ki so precej delovno intenzivne in zahtevajo usposobljene strokovnjake. Možno je le v specializiranih laboratorijih z uporabo encimskega imunskega testa, ki se uporablja za odkrivanje lipopolisaharidnih antigenov klamidije, ki delujejo s specifičnimi monoklonskimi protitelesi. Občutljivost metode je 90 %, še večjo učinkovitost pri diagnosticiranju trahoma, pa tudi drugih klamidij, zagotavlja uporaba verižne reakcije s polimerazo. Ta metoda daje pozitivne rezultate v 90-100% primerov, medtem ko kulturne študije - v 60-80%. in neposredna imunofluorescenca - v 55-75%.

Serološka diagnoza

Povezani imunosorbentni test je zelo specifičen in dostopna metoda serološka diagnostika trahom. V prisotnosti specifičnih klamidijskih antigenov, adsorbiranih na površini vdolbinic polistirenskih plošč, je ELISA lahko uporabljena tudi v katerem koli mikrobiološkem laboratoriju. Tehnika izdelave je preprosta, vendar lahko eritrocitni klamidijski diagnostikum reagira tudi s protitelesi proti Provacekovi rikeciji. Pri hudih in zmernih oblikah bolezni se reakcija fiksacije komplementa praktično ne uporablja, saj pogosto daje lažno pozitivne rezultate.